C4orf7在卵巢癌中生物学效应的体内验证

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【目的】验证C4orf7在荷人卵巢癌裸鼠体内模型中的生物学效应。【方法】基因C4orf7最初是在人扁桃体隐窝中分离的滤泡树突状细胞,又名为FDC-SP(滤泡树突状细胞分泌蛋白),我们前期的实验从组织、细胞、分子水平发现C4orf7基因在卵巢癌的侵袭转移中有促进作用,现筛选稳定转染正义反义C4orf7的卵巢癌细胞并扩增培养,建立荷人卵巢癌裸鼠体内模型。实验方法分别用荧光实时定量Real Time RT-PCR检测和We s t e r n b l o t法检测稳定转染正义反义C4orf7的卵巢癌细胞株C4orf7表达水平及E-CAD蛋白的表达,荷人卵巢癌裸鼠皮下模型随机分为8组:正义稳转C4orf7基因的A2780C4+细胞实验组、空载体A2780N1阴性对照组、未做处理的A2780细胞空白组、A2780盐水组和反义稳转C4orf7基因的SKOV3C4-细胞实验组、空载体SKOV3NC为阴性对照组、未作处理的SKOV3空白组、SKOV3盐水组,对比观察基因C4orf7干预前后卵巢癌侵袭转移的作用。【结果】C4orf7mRNA在卵巢癌细胞株A2780的空白组、阴性对照、实验组中的相对表达量分别为(0.698±0.044)、(1±0.242)、(10.770±0.146),实验组表达均明显高于空白组和阴性对照组(均P<0.05);C4orf7mRNA在卵巢癌细胞株SKOV3的空白组、阴性对照、实验组中的相对表达量分别为(3.311±0.231)、(3.102±0.104)、(0.023±0.064),实验组表达均明显低于空白组和阴性对照组(均P<0.05);Western blot检测C4orf7高表达同时并伴随着E-cad的下降,低表达同时则表现E-cad上升;所有裸鼠可见皮下瘤块不同程度的生长,瘤块组织的HE染色结果证实符合肿瘤组织结构,其中正义转染C4orf7的4#A2780C4+的实验组裸鼠皮下肿瘤体积均较其他组别大(均P<0.05),且唯有正义转染C4orf7的4#A2780C4+的实验组裸鼠肺部组织HE染色结果显示有癌灶,其他组肺部均别未见癌灶。【结论】C4orf7有助于调节卵巢癌的发生发展以及侵袭转移,检测C4ORF7的表达可能对评价卵巢癌的预后有参考价值。
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