七氟醚预处理对大鼠肝脏缺血再灌注致肝窦内皮细胞损伤的影响

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目的观察七氟醚预处理对大鼠肝常温缺血再灌注(I/R)致肝窦内皮损伤的影响,探讨线粒体ATP敏感性钾通道(MitoKATP)的作用。方法32只成年健康雄性SD大鼠,随机分为4组,每组8只。假手术组(S组):在戊巴比妥麻醉前腹腔注射生理盐水2.5ml/kg,麻醉进腹,仅分离肝脏周围韧带不阻断血流;对照组(C组):麻醉方法同S组,建立大鼠常温部分肝缺血再灌注损伤模型,约70%肝脏缺血60min再灌注90min;SEV组:行I/R前予吸入2.2%七氟醚60min,洗脱10min; 5-HD+SEV组:吸入七氟醚前10min,腹腔注射5-HD(10mg/kg),其余同SEV组。再灌注90min时进行各组血清谷丙转氨酶、谷草转氨酶、透明质酸水平、肝脏一氧化氮和内皮素含量测定,光镜HE染色和透射电镜(TEM)超微结构检查观察肝组织病理形态学改变。结果1、与S组相比,C组血清ATL、AST和HA水平,肝组织ET含量均明显升高(P<0.05);肝组织NO含量明显降低(p<0.05)。与C组相比,SEV组ALT、AST、HA水平及ET含量降低(p<0.05),肝组织中NO含量明显升高(p<0.05)。5-HD则部分抵消SEV的作用。2、HE染色:病理改变以血窦扩张充血和肝细胞变性为主,细胞坏死相对较少。C组中血窦明显充血、扩张,出现较多中性粒细胞和肝细胞变性、少量细胞坏死,肝索结构破坏,可见窦内皮细胞脱落至窦腔现象。SEV组肝血窦充血和肝细胞变性明显减轻,少见中性粒细胞,肝索结构基本完整。5-HD+SEV组表现介于SEV组与C组之间。3、透射电镜(TEM):C组可见多数窦内皮细胞肿胀,胞浆细胞器崩解,次级溶酶体增多,出现核内染色质边聚等凋亡表现,少数窦内皮细胞坏死脱落;SEV组窦内皮细胞损伤明显缓解,少数细胞内线粒体肿胀,内质网轻度扩张,多数细胞完整;5-HD+SEV组损伤表现介于SEV组和C组之间。结论1、常温下阻断大鼠约70%肝脏血流60min再灌注90min,可作为肝脏常温缺血再灌注早期损伤的研究模型。2、吸入2.2%七氟醚30min洗脱10min预处理对后继肝脏缺血再灌注致肝窦内皮损伤有保护作用。3、初步确定七氟醚预处理对大鼠常温肝窦内皮细胞缺血再灌注损伤的保护作用部分通过开放线粒体ATP敏感性钾通道而实现。
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