不同浓度的苦参碱对体外培养人增生性瘢痕成纤维细胞的增殖抑制作用和对MMP-1、MMP-9表达的影响

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目的:研究苦参碱对体外培养系中人增生性瘢痕成纤维细胞的增殖抑制作用和对MMP-1、MMP-9表达水平的影响,探讨苦参碱抑制瘢痕增生的作用机制,为其在临床上的应用提供理论依据。方法:取10例烧伤后的手术切除的增生性瘢痕(均处于烧伤后6个月—1年内),采用组织块法进行原代培养出增生性瘢痕成纤维细胞,取第3-7代处于对数生长期的细胞进行本实验。将浓度分别为0mmol/l、2.5mmol/l、5.0mmol/l、10.0mmol/l的苦参碱分别作用于上述处于对数生长期(此期各方面的性质均相对稳定)的人增生性瘢痕成纤维细胞,药物作用24h、48h后,以细胞增殖抑制率为指标,用MTT(四甲基偶氮唑蓝)比色法测定不同浓度的苦参碱对人增生性瘢痕成纤维细胞增殖的影响;通过酶联免疫吸附试验(Enzyme-linked immuno sorbent assay,ELISA)试剂盒检测加入上述不同浓度的苦参碱作用24h、48h后,细胞上清液中基质金属蛋白酶(MMP-1、MMP-9)表达水平。结果:①不同浓度苦参碱对体外培养的人增生性瘢痕成纤维细胞的生长有明显的抑制作用(p<0.05),并且呈现浓度依赖性和时间依赖性,其中以10mmol/l组中抑制率最强,药物作用24h和48h后的抑制率分别为34.9%、63.6%。②各浓度组苦参碱作用于体外培养系中的成纤维细胞24h和48h后,MMP-1、MMP-9的表达量与对照组相比增加,差异有统计学意义,p<0.05。结论:苦参碱对体外培养的人增生性瘢痕成纤维细胞具有抑制作用,在实验范围内呈现剂量依赖性;在实验范围内不同浓度的苦参碱能够促进基质金属蛋白酶(MMP-1、MMP-9)的表达,能够降解细胞外基质成分(Extracellular Matrix,ECM)。苦参碱在增生性瘢痕的防治上具有很好的应用前景。
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