该论文以两性生殖卤虫和孤雌生殖卤虫为材料,应用多种分子生物学技术和手段,对不同生殖方式的卤虫以及两性生殖不同性别卤虫基因组的差异进行了研究.RAPD技术作为一种十分快捷简便的分子标记技术,已经得到十分广泛的应用,并且在不同性别个体基因组差别研究中发挥作用.该文共选用406个RAPD随机引物分别对雌雄个体基因组进行了扩增,只有1个引物可以扩增出稳定的差异带.这一结果说明不同性别卤虫之间基因组DNA十分相似.引物S135可以从雌性基因组中扩增出一特异性片段,长度为479bp,为一功能未知的新序列.Southern杂交分析显示,该片段在雌雄基因组中均有存在,随后根据该片段设计特异引物对雌雄基因组DNA进行扩增,该引物在雌雄基因组中扩增效率存在差异,该序列在雌雄基因组中已发生改变.应用RDA技术对雌雄不同性别卤虫基因组DNA的差异进行了分析.目前多数的报道认为卤虫性别机制为ZW/ZZ,即雌性卤虫性别机制为ZW型,而雄性卤虫为ZZ型.以此假说为依据,作者以雄性基因组DNA制备Driver DNA,和雌性基因组DNA制备的Tester DNA进行RDA分析,试图发现在W染色体上的特有序列.经过四轮消减,消减产物长度逐渐变短,并最终集中分布于200~300bp之间,将消减产物进行克隆,构建雌雄基因组差异DNA文库.从文库中随机测序的序列Rm2和Rm3均为未知序列,对这些序列以及文库中更多片段的研究还有待深入.在已知的有关各种模式动物性别决定的复杂分子调控网络中,dsx基因是果蝇性别决定机制中的一个重要基因.在昆虫的性别决定基因中,dsx基因在性别发育中出现的时间似乎最长,其同源基因已在果蝇近缘种以及其它昆虫中被发现,在鳞翅目的家蚕中发现的其同源基因名为Bmdsx.该文以家蚕Bmdsx基因中的雌雄差异表达部位设计引物,试图在不同生殖方式的卤虫中发现与其相关的DNA片段.经过优化扩增条件,可以从孤雌生殖的种群基因组DNA中扩增出两个长度分别为900bp和200bp左右的DNA片段:Apdsx900(AY346101)和Apdsx200;而在两性种群中则没有DNA片段被扩增出.这两个DNA序列的长度分别为862bp和215bp,且后者可以认为是前者的部分序列.和预期结果不同的是,在GenBank中没有其同源序列存在.该序列仅在引物序列区与家蚕的Bmdsx基因同源.Apdsx900序列A和T含量为55.68﹪,不含有可以通读的读码框;该序列从位点247至位点296为一50bp长的重复序列单位,该重复序列单位在Apdsx900中存在有9个拷贝,不同拷贝之间的相似性在78﹪左右.Southern杂交结果进一步证实该DNA片段为尕海孤雌生殖卤虫基因组特异,同时也表明Apdsx900为一高度重复序列,其重复序列单位长度在基因组中较为一致.进一步的荧光原位杂交显示,其中79﹪(83/105)的细胞核中显示两个杂交信号,而在山西两性生殖卤虫的细胞核中则没有杂交信号.该文首次报道了尕海孤雌生殖卤虫基因组特异DNA序列Apdsx900,其为高度重复序列.目前尚未见其它有关孤雌生殖卤虫基因组特异序列的报道.该序列的发现为探讨卤虫生殖方式的形成,孤雌生殖卤虫的倍性及基因组特征,以及为孤雌卤虫种质资源的鉴定提供了有价值的线索.从该文的研究结果可以说明,两性生殖卤虫雌雄个体基因组之间具有很高的相似性,同时还有与性别相关的DNA序列存在.同样,在不同生殖方式的卤虫基因组之间可能同样存在着生殖方式相关的DNA序列.与已知模式生物的性别决定基因调控环节的保守结构域在卤虫中也有存在,而且仍具有很高的保守性.此外,在不同生殖方式的卤虫基因组之间同样存在着差异序列.这些差异序列可以为深入研究卤虫的有性繁殖机制提供帮助.