菊花(ChrysanthemummorifoliumRamat.)原产我国,为菊科菊属栽培种,具有很高的观赏和经济价值,是我国十大传统名花和世界四大切花之一。我国是菊花的起源中心和菊属种质资源的分布中心,虽然其种质资源丰富,栽培品种繁多,花色、花型丰富,但菊花的遗传背景和栽培方式多种多样,在生产过程中易发生变异。花色作为其重要的观赏性状,对花色变异的研究也一直倍受关注,中国传统菊花共有3000多个品种,其中400多个品种都是芽变选种获得。我们通过在田间选择花色发生变异的菊花品种,以花色变异的花瓣作为外植体,通过组织培养技术再生分离芽变的性状,通过SRAP标记分析鉴定’绿安娜’系列芽变后代,并建立其芽变品种’白安娜’的遗传转化体系,研究结果可为菊花花色芽变及基因工程育种奠定基础。主要研究结果如下:1.以在田间观察到的12个花色芽变菊花品种为材料,通过组织培养技术分离芽变性状,获得了’绿安娜’、’QX-166’、’南农功勋’ 3个菊花品种芽变材料的分离后代。对’绿安娜,芽变分离后代的花色进行观察,发现后代花色存在分离,可能与来源芽变花瓣不同部位有关。2.用筛选的40对引物对分离获得及收集保存的’绿安娜’系列芽变后代进行SRAP分析,共获得扩增条带423条,但在’绿安娜’与8个芽变后代中均未扩增出多态性条带,没有获得引起花色芽变的特异性位点,说明系列花色芽变可能仅涉及点突变。另外,还可能与我们筛选的引物组合有限有关。3.以’绿安娜,芽变分离后代’白安娜’为试验材料,建立了高效遗传转化体系。以’白安娜,无菌苗叶片为外植体,发现在MS + 6-BA1.0 mg·L1 + NAA 0.5 mg·L-1分化培养基上,分化率最高,为67.78%;以潮霉素(Hyg)作为遗传转化的筛选标记,结果表明,8 mg·L-1作为叶盘分化的选择压较为合适;8 mg·L-1为生根筛选的适宜浓度。