第一部分：瑞芬太尼预处理对人肝细胞缺血再灌注损伤的保护作用目的探讨瑞芬太尼预处理对人肝细胞缺血再灌注损伤的是否有保护作用。方法培养人肝细胞株HL7702，体外模拟建立肝细胞缺血再灌注损伤模型。将培养的肝细胞分为6组，分别为正常培养组（N组），缺血再灌注组（IR组），瑞芬太尼预处理组（RE组）：RE1组：瑞芬太尼0.5ng/ml预处理1h；RE2组：瑞芬太尼5ng/ml预处理1h；RE3组：瑞芬太尼50ng/ml预处理1h，生理盐水组（NS组）。正常培养组正常条件下培养，其他组模拟缺血8h，再灌注4h。到终末时间点测定：（1）MTT法检测肝细胞活力；（2）乳酸脱氢酶释放法进行肝细胞繁殖和毒性的检测；（3）全自动生化仪检测细胞培养上清液AST、ALT、LDH的含量；（4）MDA试剂盒检测肝细胞内MDA含量；（5）倒置相差显微镜下观察各组细胞的形态学改变。结果RE2组细胞活力比IR组和NS组升高，但比N组降低，细胞死亡率、细胞上清液中AST、LDH水平以及细胞内MDA含量比IR组和NS组降低，但比N组升高，差异有统计学意义（P<0.05）；而RE1和RE3组与IR组、NS组各项指标差异无统计学意义（P>0.05）。倒置相差显微镜下可见缺血再灌注损伤后细胞间隙增大，细胞出现皱缩、变圆、体积变小，亮度增加，甚至脱落。RE2组细胞损伤程度减轻，贴壁细胞数量增多，皱缩和脱落的细胞减少。第二部分：瑞芬太尼预处理对人肝细胞缺血再灌注损伤保护作用的浓度依赖性目的研究瑞芬太尼预处理对人肝细胞缺血再灌注损伤的保护作用与浓度之间的关系，探讨瑞芬太尼预处理的适宜浓度。方法将培养的人肝细胞按瑞芬太尼的浓度梯度分为9组，分别为正常培养组（N组），缺血再灌注组（IR组），瑞芬太尼预处理组（RE组）：RE1组：瑞芬太尼1ng/ml预处理1h；RE2组：瑞芬太尼5ng/ml预处理1h；RE3组：瑞芬太尼10ng/ml预处理1h，RE4组：瑞芬太尼20ng/ml预处理1h，RE5组：瑞芬太尼30ng/ml预处理1h，RE6组：瑞芬太尼40ng/ml预处理1h，生理盐水组（NS组）。正常培养组正常条件下培养，其他组模拟缺血8h，再灌注4h。到终末时间点测定：（1）MTT法检测肝细胞活力；（2）乳酸脱氢酶释放法检测肝细胞死亡率；（3）MDA试剂盒检测肝细胞内丙二醛含量。结果RE1~RE5组细胞活力比IR组和NS组升高，但比N组降低，细胞死亡率和细胞内丙二醛含量比IR组和NS组降低，但比N组升高，差异有统计学意义（P<0.05）；而RE6组与IR组、NS组各项指标差异无统计学意义（P>0.05）。结论临床有效血药浓度（1~30ng/ml）瑞芬太尼预处理对肝细胞缺血再灌注损伤具有保护作用，低浓度（0.5ng/ml）和高浓度（≧40ng/ml）瑞芬太尼预处理则无此作用。