田基黄中活性成分的分离分析及其生物活性研究

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本章分别从饱和澄清水的用量、沉淀温度和沉淀时间三个方面去考察槲皮素的提取率的影响因子,运用响应面(RSM)优化实验法探讨了这三个因素的影响因子的大小并分析得出最佳工艺条件:64mL澄清石灰水(25mL提取液),沉淀温度为61℃,沉淀时间为31min。在此工艺条件下田基黄中槲皮素的提取率平均值达到3.256%。并对分离产物进行了结构表征(UV、IR、HPLC)。结果表明:采用钙离子沉淀法从田基黄中分离得到的槲皮素的结构与槲皮素标准品结构相吻合。以芝麻油为研究对象,考查了紫外光、反应温度对芝麻油过氧化值的影响以及提取液的自由基清除能力。结果表明:用紫外光常温辐射6h,添加田基黄槲皮素溶液的过氧化值比加BHT和不加抗氧剂分别低14.73%和25.53%;在60℃下反应,芝麻油中添加田基黄槲皮素溶液的过氧化值比加BHT溶液和不加抗氧剂分别低38.4%和70.3%;自由基清除能力实验表明,60℃时,槲皮素溶液的还原能力是BHT的1.88倍;50℃时槲皮素溶液的羟基自由基清除率、O2-·清除率和过氧化氢清除率分别是BHT的1.49倍、1.02倍和1.04倍。采用离子沉淀络合法分离槲皮素的基础上,考察了槲皮素及槲皮素钙的抑菌活性,主要从溶液浓度、热处理温度和pH值这三个因素分析了槲皮素提取液对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌的抑菌活性的影响,并比较了其抑菌活性。结果表明:槲皮素提取物对大肠杆菌,枯草芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度分别为3.125μg/mL、6.25μg/mL、1.5625μg/mL。槲皮素溶液的pH为8时,对大肠杆菌的抑菌圈直径是12.5mm,此时槲皮素溶液对大肠杆菌表现出了最好抑菌效果;当槲皮素溶液的pH为7-8时,对枯草芽孢杆菌的抑菌圈直径是11.6mm,此时槲皮素溶液对枯草芽孢杆菌抑菌活性最大;pH为5时,对金黄色葡萄球菌的抑菌圈直径是12.4mm,此时槲皮素溶液对金黄色葡萄球菌表现出了最好抑菌效果。槲皮素提取液具有较强的耐热性能,分别在20℃、50℃、80℃温度下处理过的12.5μg/mL的田基黄槲皮素溶液对大肠杆菌的抑菌圈直径分别为12.8mm、12.8mm和12.0mm;分别在20℃、50℃和80℃温度下处理过的12.5μg/mL的田基黄槲皮素溶液对枯草芽孢杆菌的抑菌圈直径分别为10.2mm、10.0mm和10.0mm;同样温度下处理过的12.5μg/mL的田基黄槲皮素提取液对金黄色葡萄球菌的抑菌圈平均直径分别为11.3mm、11.0mm和10.8mm。文章通过GC-MS法分别对提取出来的田基黄茎叶和根部挥发油中的化学成分的种类和含量分别进行分析。从田基黄茎叶挥发油中鉴定出包括烷类(22.83%)、烯类(18.19%)、胺类(4.32%)、酚类(4.71%)、醛酮类(10.61%)、醇类(8.12%)、吲哚类(9.6%),酸类(21.62%)等在内的43种化合物。根部挥发油中共检测出32个组分,其中含有酸类、烷类,烯类、胺类、酚类、醛酮类、醇类、吲哚类等8类化合物,相对含量分别为40.09%、14.06%、14.54%、4.15%、3.77%、11.09%、11.45%、0.95%。
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