BDNF对帕金森氏病大鼠模型多巴胺能神经元的影响

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脑源性神经营养因子(Brain derived neurotrophic factor,BDNF)是由猪脑提取液中获得的一种分子量为13.5KD的碱性蛋白,其氨基酸序列的55%~60%与神经生长因子(Nerve Growth Factor,NGF)、神经营养因子-3(Neurotrophic Factor-3,NT-3)同源,它不但对多种神经元的发育、分化和再生具有维持和促进作用,也能挽救损伤的脊髓运动神经元和感觉神经元.目的:该课题的目的在于观察脑源性神经营养因子对帕金森氏病(Parkinsons disease,PD)大鼠模型黑质多巴胺能神经元的影响.方法:选用Wistar种系大白鼠,体重230~250克,随机分3组,通过立体定向法确定黑质部位,之后给予组1(生理盐水对照组,简称对照组)10只大鼠,注射相应量(5μl)的生理盐水;组长(注射6-OHDA制作帕金森氏病模型组,简称6-OHDA组)10只大鼠,注射6-OHDA,8μg(2μg/μl);组3(6-OHDA+BDNF组)10只大鼠,在制成帕金森氏病模型后再向同侧中脑黑质注射BDNF,3μg/5μl,连续6天,每天1次.分别观察动物的旋转行为,免疫组化染色方法观察黑质酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase,TH)阳性神经元的显微结构变化及数量,高效液相法测定纹状体部多巴胺(dopmine,DA)含量的变化.结果:单侧黑质内注入6-OHDA制成帕金森氏病大鼠模型后,6-OHDA组与对照组比较,产生旋转行为,(6-OHDA+BDNF)组在观察旋转行为时,症状明显改善;镜下见TH阳性神经元主要见于对照组的黑质致密部,数量为42.3+7.56个/μm<2>,模型组黑质密部TH阳性神经元数明显减少为2.41+1.07个/μm<2>,(6-OHDA+BDNF)组黑质致密部TH阳性神经元数为15.36+3.04个/μm<2>;纹状体部多巴胺含量:生理盐水组为11.4±1.2μg/g,6-OHDA组3.6±0.5μg/g,(6-OHDA+BDNF0组5.5±0.6μg/g,.结论:(1)6-OHDA对黑质多巴胺能神经元有损害作用制成偏侧帕金森氏病大鼠模型.(2)BDNF能改善6-OHDA所致的帕金森氏病大鼠黑质多巴胺能神经元数目的减少;BDNF能明显抑制6-OHDA引起的纹状体部多巴胺含量降低;BDNF可抑制6-OHDA对黑质多巴胺能神经元的毒性作用.
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