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本文拟通过农杆菌介导的遗传转化技术,利用含有叶绿体Cu/ZnSODcDNA的反义RNA和RNA干涉载体对烟草进行了转化,产生叶绿体Cu/ZnSOD基因沉默突变体,从而为研究Cu/ZnSOD基因的功能及相关的信号转导途径提供基础。通过对获得的转基因植株进行一系列生理功能分析得到一些结果:
在本实验中成功构建了三种含有编码番茄叶绿体Cu/ZnSODcDNA的植物双元表达载体。通过农杆菌介导将三种双元表达载体转化到两种烟草中,Nicotianatabacum的14个dsSOD株系和5个antiSOD株系,以及N.plumbaginifolia的58个dsSOD株系和21个antiSOD株系。选取转基因烟草的T1代幼苗进行生理测定和生长分析,比较转化株和野生型的差异。为了研究转基因植株在盐胁迫下的响应,模拟盐浓度逐渐增加的环境对T1代烟草幼苗进行NaCl处理。本文比较了在不同浓度的外源光氧化剂MV诱导下,转基因烟草T1代幼苗叶片的PSⅡ活性、电解质渗漏率等的变化。本文还采用辐射剂量为8.82kJ/m2的UV-B处理转基因烟草T1代幼苗,以及在UV-B辐射的同时加入100mMNaCl进行复合处理,研究转基因植物叶片的PSⅡ活性、叶绿体中过氧化氢生成和抗氧化酶类的变化。