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[目的] 心房颤动和快速心房激动可引起心房细胞的电生理、缝隙连接（Gapjunction,GJ）的改变。这些改变又促进心房颤动的发生和维持。以前有关电生理和缝隙连接重构的实验研究都是在正常的动物身上进行的。而临床上心房颤动多数是发生在病理状态下,在一定病理基础上,快速心房激动对心房的电生理、缝隙连接影响也许与在完全正常情况下有所不同,有关这方面的研究极少。 甲状腺功能亢进是心房颤动的常见原因,10%——15%的甲亢患者可合并心房颤动。这些心律失常即使在甲状腺素水平完全正常后3个月内仍然存在,这说明有引起心律失常的基质存在。这些基质是缝隙重构、还是电生理重构,目前尚不清楚。急性甲状腺素水平增高虽然不影响Ica-L,但明显提高基础状态下心房肌细胞内Ca2+浓度,促进肌浆网的Ca2+释放,引起细胞内的Ca2+超载。不同甲状腺素水平与离子通道表达关系研究表明,高甲状腺素时,编码Ica—α亚单位的基浙江大学博士学位论文因表达水平下降。由此可见高甲状腺素水平本身就有致心房肌电重构的可能,但目前尚无直接的实验证据。 心房肌的连接蛋白主要是Cx43和Cx40,响激动的传导,天,可使Cx43而导致心律失常。研究表明,它们在数量和分布上的变化都会影甲状腺素与鼠肝脏细胞共同培养2增加4一5倍,甲状腺素可以改变Cx目前尚无甲状腺素对心房肌Cx40影响的文献报道,在翠丸和付攀细胞上的分布。也未见在高甲状腺素水平时,心房快速激动对Cx数量和分布影响的报道。 肺静脉（PulmonarY veins,PVs）与临床心房颤动密切相关。Verheule等发现犬肺静脉肌内袖细胞呈螺旋式走行,延伸到肺静脉内的心肌组织结构为激动折返提供了物质基层。Chen等报道甲状腺素可促使正常家兔肺静脉细胞产生触发活动,肺静脉细胞自律性增高和触发活动增加了甲亢时肺静脉细胞的致心律失常性。但高甲状腺素水平及快速电激动对肺静脉缝隙连接的影响如何,目前尚未见报道。 本实验的目的:1.研究高甲状腺素水平及在此基础上的快速心房激动对心房电生理特性的影响。2.高甲状腺素水平及在此基础上的快速心房激动对心房及肺静脉缝隙连接的影响。为甲状腺功能亢进患者心房颤动的防治提供新的理论依据。 【方法】 将实验家兔随机分为正常对照组（A组,n=10）、起搏组（B组,n=10）、甲亢组（C组,n=14）和甲亢起搏组（D组,n=12）。后两组给予腹腔注射左旋甲状腺素0.45mg/kg.d,持续4周。根据体重减轻、体温升高、心率加快,及血清T3、T4升高等证明甲亢模型成功。四组家兔经麻醉,固定,分离右侧颈外静脉和颈内静脉,分别置入电极用于心房起搏和描记心房电位。将描记电极接于多导生理仪,将起搏电极接于程控刺激仪,以脉宽Zms测定起搏闭值,设定2倍起搏闭值为输出电压。正常对照组和甲亢组在实验过程中同样放置导管,但不刺激。注射美托洛尔（0 .Zmg/kg）及阿托品（0 .O4mg/kg）以阻断自主神经对心脏的影响,随后以微量注射泵维持（美托洛尔0.02mg·kg一‘·h一‘,阿托品0.oo7mg·kg一‘·h一,）。同时在注射药物后十五分钟,浙江大学博士学位论文记录窦性心率,以程控刺激法,sms步长反扫,分别测定基础起搏周期（Dri veCyele Length,DCL）为200ms、150ms、130ms时的AERP即AERPZoo,AERP15。,AERP13。。以60Obpm固定频率进行快速心房起搏,于起搏后2,4,6小时重复测定AERP。完成6小时快速心房起搏后处死实验兔,取肺静脉、左、右心房组织,选取每个标本的一部分作病理切片;以western blot法对Cx43及Cx40蛋白表达进行半定量测定;以RT一PCR法对Cx43及Cx4O mRNA表达进行半定量测定;用免疫荧光抗体标记激光共聚焦显微镜检测Cx4O和Cx43的分布。 (结果】 1.电生理 1 .1各组AERP的变化情况 对照组在整个时间过程内AERP无显著变化。起搏组在快速心房起搏2、4、6小时后,AERPZ。。、AERP;5。、AERP;3。均较本组的基础状态（即起搏0小时）和对照组的AERP短。甲亢组各时间段的AE即2oo、AE即15。、AE即13。明显短于对照组相应的AE即。快速心房起搏使甲亢起搏组的AEI汗从本组的基础状态进一步缩短,且短于甲亢组相应的AE即。 1.2 AERP的频率适应性 对照组的AERP频率适应性正常,当基础周长:由200ms缩短为13OmS时,AERP13。较AERP20。缩短了1 1.5士4.Zms。起搏组在基础状态时,AERP13。较AERP200缩短了9.0士6.4ms,但快速心房起搏6小时后AERP仅缩短1.5士4.3ms。甲亢组在基础状态时AER氏。较AERPZ。。仅缩短了2.8士2.6ms,明显短于对照组 （2.8士2.6ms vs 1 1.5士4.Zmsp<0.01）。心房快速起搏6小时后,尽管使甲亢兔的AERP进一步缩短,但各时间的AERPL30较AERPZoo的缩短程度并未进一步加剧。 2.缝隙连接 2.1连接蛋白Cx43和Cx40的表达 正常对照组和起搏组左、右心房Cx43的蛋白表达量无差异,甲亢组和甲亢起搏组左、右心房Cx43蛋白表达量较正常对照.组和起搏组明显增加。与甲浙江大学博士学位论文 亢组相比,甲亢起搏组的左、右心房Cx43蛋白表达量有所下降。各组左心房和右心房相比,其Cx43蛋白表达量无显著差异。 左、右心房Cx4O的蛋白表达量在正常对照组和起搏组之间无