子宫内膜异位症差异蛋白的相关研究

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第一部分正常生育年龄女性子宫内膜蛋白质表达谱系建立及子宫内膜异位症患者在位、异位子宫内膜蛋白质与正常子宫内膜蛋白质差异表达谱系的构建目的:二维电泳和质谱联合作为新的蛋白质研究的主要方法之一,使蛋白质组学的研究得到了飞速发展。本研究拟通过二维电泳技术和质谱建立正常生育年龄女性子宫内膜的蛋白质谱系,为进一步研究子宫内膜相关性疾病作准备。建立子宫内膜异位症患者在位、异位子宫内膜(卵巢子宫内膜异位囊肿壁组织)蛋白质表达与正常子宫内膜蛋白质差异表达谱系。方法:对2例已婚生育年龄女性志志愿者的正常增生中晚期子宫内膜进行二维电泳,并进行质谱分析。对三例正常育龄期女性的正常增生中晚期内膜,三例(同为增生中晚期)内膜异位症患者的在位及异位内膜分别进行二维电泳,通过质谱,鉴定差异蛋白。结果:已得到分辨率高、包含千佘个蛋白斑点的二维电泳图谱,质谱分析获得10个差异蛋白。我们发现在正常内膜与患者异位内膜之间存在113个差异蛋白点,正常内膜与患者在位内膜之间为44个差异点,而患者在位与异位内膜之间则存在164个差异点。结论:二维电泳能对子宫内膜的组织蛋白质进行良好的分离,进而进行质谱分析。正常内膜与患者在位,异位内膜三者之间均存在大量蛋白差异。第二部分Prohibitin及核内不均一核糖核蛋白hnRNP A2/B1在子宫内膜异位症表达的初步研究目的研究Prohibitin蛋白和hnRNP A2/B1在正常子宫内膜、子宫内膜异位症(简称EMs)患者在位内膜、患者异位内膜的细胞定位及之间的表达差异,为进一步研究这两种蛋白在EMs发生发展中的作用奠定基础。方法对三例育龄女性志愿者的正常增生中晚期子宫内膜、三例EMs患者的在位子宫内膜及其异位子宫内膜(卵巢子宫内膜异位囊肿壁组织)进行免疫组化和Western blot分析;光学显微镜下分析免疫组化结果,观察阳性染色的细胞定位,分布及强度。用AlphaEaseFC图像分析软件分析Western blot结果,并用SPSS 11.0统计软件行单因素成组方差分析。结果Prohibitin主要表达于腺上皮和间质细胞的细胞浆中,hnRNPA2/B1主要表达于腺上皮和间质细胞的细胞核内。两种蛋白在EMs患者在位内膜和异位内膜中的表达强度,均低于正常内膜中的表达;而在患者在位内膜和异位内膜中的表达差异均无显著性。结论Prohibitin和hnRNP A2/B1可能参与EMs的发生发展。
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