据WHO报道，宫颈癌为女性人群中最主要的癌症之一。高危型人乳头瘤病毒(Human Papillomavirus, HPV)感染是引起女性宫颈癌的主要病因。2008年以来，每年全球宫颈癌新发病例超过50万人，在中国每年也有约10万被确诊罹患宫颈癌。有15种高危型HPV能诱发宫颈癌，除HPV16/18这两种主要型别外，HPV45型也是一种高危型病毒，虽然在全球宫颈癌的流行分布上，HPV45只与4.4％的宫颈癌的发生密切相关，在所有的高危型别中位列第5位，但在欧洲和非洲一些国家，HPV45型却极为常见，在某些地区，甚至与HPV18相当或略高。因此，有必要开发一种针对HPV45的疫苗来有效的控制该疾病的发生。　　 研究证实，HPV主要衣壳蛋白L1在体外一定的条件下，能自组装成具有与天然病毒类似的颗粒结构，并能模拟病毒的表位，是一种良好的疫苗形式。本研究利用大肠杆菌系统成功地表达可溶性HPV45L1编码蛋白，通过的2步骤柱纯化模式:阳离子交换层析和羟基磷灰石层析后，获得了纯度达95％以上的目标蛋白—HPV45L1。并尝试其自组装条件的摸索，发现在20mM PB7.4、0.5M NaCl条件下，HPV45L1能较好地组装成VLPs。后续实验中，我们尝试对该小量制备实验方法进行中试水半的放大，对药典规定各项检测指标进行合理检测，结果表明，该中试工艺符合疫苗生产工艺要求。　　 本研究将中试生产的HPV45 L1 VLPs混合铝佐剂制成疫苗，免疫小鼠，通过ELISA检测实验及假病毒中和实验检测，结果表明，该疫苗能产生104-106的抗体滴度，验证了HPV45 L1 VLPs具有较好的保护性，同时动物保护实验显示，半数有效量(ED50)为0.007μg。验证了HPV45 L1 VLP用于疫苗生产的可行性。同时，通过小鼠免疫，我们筛选得到了15株线性或构象的单克隆抗体，为后续HPV45L1五聚体及VLPs相关性质鉴定奠定基础。　　 为进一步了解HPV45 L1 VLPs的结构性质，本研究采用冷冻电镜技术，对中试生产的VLPs进行结构解析，初步获得一个22(A)的三维重建结构。证实了本研究获得的HPV45 L1 VLPs完全可以模拟病毒的天然构象，保证了疫苗的可靠性。　　 综上所述，本论文从现阶段研究宫颈癌病源体—HPV这一热点出发，利用大肠杆菌系统表达高危型HPV45L1编码蛋白，通过其自组装条件摸索，中试工艺放大，原液检定，冷冻电镜重建三维结构技术等于段，验证了其成为疫苗的可能性，并通过单克隆抗体筛选鉴定，获得了能用于疫苗性质鉴定的可靠保证。为HPV的结构研究奠定了基础，并为今后HPV疫苗设计提供新的参考。