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蜂毒肽(melittin，MLT)是蜂毒的主要成分，具有抗菌消炎、抗肿瘤、抗艾滋病毒及抗辐射方面等作用。本研究通过卵巢直接注射法成功制备了MLT转基因小鼠和鸡，主要内容如下：
(1)对MLT基因进行改造：第七位Lys改为Arg，将第八位Val改为Gly，去除第十三位Leu加大疏水力矩，降低溶血性。将改造后的基因插入质粒pVAX1的多克隆酶切位点区，构建pVAXl-MLT真核表达质粒，大量抽提，得到高纯度卵巢注射用真核质粒并测定浓度。
(2)取12只体重相近的雌性昆明白小鼠，随机平均分为三组。通过外科手术将pVAXl-MLT质粒注射到小鼠卵巢内，第一组每侧卵巢注射质粒浓度为50ng/μL的质粒5μL,第二组每侧卵巢注射质粒浓度为lOOng/μL的质粒5μL,第三组每侧卵巢注射PBS缓冲液5μL，手术恢复后与雄鼠自然交配。取子代小鼠尾部组织提取基因组，用PCR方法检测基因组阳性率：第一组为72.97％(27/37)，第二组为75.76％(25/33)。PCR产物测序结果与已知的MLT基因序列吻合度为100％。对MLT基因在子代小鼠中的表达进行检测，取1只PCR检测阳性小鼠，通过RT-PCR检测证实子代小鼠的肝脏、肾脏和卵巢中有MLT基因转录水平上的表达，在心脏中未见MLT基因的表达，说明转基因小鼠中外源基因的表达有组织差异性。子代小鼠皆健康存活。
(3)通过外科手术将质粒pVAXl-MLT质粒注入llod麻鸡卵巢，待试验母鸡开产后，每3d对其人工授精，收集种蛋，进行孵化。取10d子代小鸡翅膀的肌肉组织，提取基因组，用PCR方法检测子代基因组阳性率为34.8％(69/198)。取2只PCR阳性小鸡的心脏、肝脏、肾脏和卵巢抽提RNA，用RT-PCR检测转录基因的表达情况，结果显示1只小鸡MLT基因在心脏、肝脏、肾脏和卵巢中皆有表达，另1只鸡MLT基因在肝脏、肾脏和卵巢中表达，而心脏检测结果为阴性。免疫荧光检测实验中所检测的PCR阳性小鸡，其心脏、肝脏、肾脏和卵巢检测结果皆为阳性。
实验结果表明，通过卵巢直接注射法可成功制备MLT转基因小鼠和鸡。卵巢注射法具有简便、高效、花费低等优点，是一种具有广阔运用前景、可用于制备各种转基因动物的优良转基因技术。实验结果为建立生物反应器生产药用蛋白、拓宽抗微生物肽的应用前景提供一条简便可行的新途径，为培育高产、优质、抗病力强的动物新品种提供具有重要参考价值的新方法。