目的:探讨乳腺癌CAFs细胞中氧化型ATM对乳腺癌细胞侵袭的影响及机制。方法:(1)运用免疫组织化学方法检测乳腺癌癌旁组织、浸润、浸润伴癌细胞转移的乳腺癌组织基质CAF细胞中p-ATM的表达情况;以ATM特异性抑制剂KU60019或DMSO分别处理CAFs,在常氧和低氧条件下培养乳腺癌CAFs 6h,收集其条件培养基与乳腺癌细胞共培养,检测氧化型ATM活化与失活的乳腺癌CAFs对癌细胞侵袭的影响。(2)以常氧培养的NFs为对照,低氧处理6h的CAFs为处理组,分别提取蛋白,进行磷酸化蛋白质组学检测,运用生物信息学方法筛选受氧化型ATM磷酸化的靶蛋白,分析氧化型ATM及靶蛋白参与的潜在生物学过程。(3)运用Western blot和细胞免疫荧光等方法检测氧化型ATM活化与失活对乳腺癌CAFs细胞自噬的影响,运用免疫共沉淀方法检测氧化型ATM活化与失活对靶蛋白BNIP3磷酸化及其对细胞自噬的影响。(4)运用超高速离心法提取乳腺癌CAFs来源的外泌体,并检测氧化型ATM活化与失活对外泌体分泌及外泌体内含蛋白富集的影响,筛选潜在靶蛋白,采用siRNA技术敲低CAFs靶蛋白,探讨其对癌细胞侵袭的影响及调控机制。结果:(1)与正常癌旁组织相比,浸润性乳腺癌、浸润伴癌细胞转移的乳腺癌患者组织CAFs中p-ATM呈显著高表达,低氧处理6h诱导氧化型ATM活化的乳腺癌CAFs能显著增强癌细胞的侵袭能力。(2)磷酸化蛋白质组学分析结果显示,CAFs氧化型ATM可能与细胞自噬有关。(3)乳腺癌CAFs氧化型ATM通过磷酸化BNIP3 S135位点诱导细胞自噬的发生,并促进癌细胞侵袭。(4)氧化型ATM影响乳腺癌CAFs外泌体中GPR64蛋白富集,通过激活癌细胞NF-κB信号通路促进癌细胞侵袭转移。结论:乳腺癌CAFs氧化型ATM诱导的细胞自噬影响CAFs外泌体GPR64蛋白富集,通过激活癌细胞NF-κB信号通路促进其侵袭转移。