五种观赏藓类植物的配子体发生与组织培养

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本文以尖叶匐灯藓Plagiomnium cuspidatum (Hedw.) T. Kop.、梨蒴珠藓Bartramia pomiformis Hedw.、角齿藓Ceratodon purpureus (Hedw.) Brid.、鳞叶藓Taxiphyllum taxirameum (Mitt.) Fleisch.、桧叶金发藓Polytrichum juniperinum Hedw.为试验材料,采用模拟土壤培养、配子体组织培养和孢子培养等实验手段,探讨了五种藓类的配子体再生及其发育过程,研究了几种激素对于尖叶匐灯藓茎段增殖的影响。主要结论如下:1以尖叶匐灯藓茎段为外植体建立藓类茎段增殖系统。以幼嫩配子体为实验材料,用有效氯为1.0%的次氯酸钠加几滴肥皂水消毒4min,用无菌水冲洗6~8次,每次浸泡30s,吸干表面水分,切成1cm长的茎段接种,每60天继代一次。45g/L的蔗糖浓度对尖叶匐灯藓茎段的增殖系数最大, 0.02mg/L的BA ,0.2mg/L的2,4-D,0.02mg/L的NAA ,1mg/L的GA3 ,对其增殖或生长的效果最好,TDZ对其增殖不明显或存在抑制效应。2建立了梨蒴珠藓组培体系。挑选蒴帽完整的梨蒴珠藓孢蒴(带1cm蒴柄),用1.0%的次氯酸钠对其进行表面消毒,消毒时间6min,用无菌水反复冲洗,用滤纸吸干;梨蒴珠藓原丝体的培养用改良过的Knop培养基;待长出藓丛后转入MS+ BA0.5mg/L+ 2,4-D0.1 mg/L+ 4%蔗糖+ 0.8%琼脂粉(pH5.8)诱导愈伤组织,愈伤组织30天继代一次;诱导配子体再生用愈伤组织块作为外植体来源时,用不含激素的Knop培养基最好,也可以用无菌藓株在不含激素的MS培养基上诱导出数量较多的梨蒴珠藓幼小配子体。3初步建立角齿藓组培体系。用1.0%的次氯酸钠对角齿藓孢子体进行表面消毒,消毒时间6min,然后反复冲洗;愈伤组织的诱导,添加了BA1.0mg/L的Knop培养基效果较好;愈伤组织的再分化用MS培养基;MS培养基同样适合以角齿藓无菌藓株诱导配子体的再生。4用1.0%的次氯酸钠加上几滴肥皂水对鳞叶藓孢子体进行表面消毒,消毒时间为8min。桧叶金发藓用0.1%升汞常规消毒法2min和1.0%次氯酸钠消毒6min两种消毒方法效果相同。5梨蒴珠藓、鳞叶藓、桧叶金发藓都属于外生孢子萌发类型,其中梨蒴珠藓孢子萌发属于真藓型,桧叶金发藓属于葫芦藓型,鳞叶藓初步确定为光藓型。本研究建立的苔藓培养实验体系,为苔藓植物的培养提供了参考,揭示了藓类植物配子体发生的几种途径。
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