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目的 地榆为凉血止血、解毒敛疮类常用中药,同时随着地榆升白片的广泛应用,地榆升高白细胞作用的效果也得以肯定,且服用量小,成人日服最大剂量折算成生药材仅为60mg(极量)。但该品种以单味药粉末入药,在临床使用过程中,面临着量效矛盾、物质基础和作用机理不明、起效缓慢、作用不强烈等瓶颈问题,针对这些问题,本项目围绕地榆升高白细胞的物质基础进行系统研究,为开发快速持久升白兼具骨髓保护作用的药物提供理论依据。方法以环磷酰胺给药建立小鼠白细胞减少的病理模型,灌胃给予经处理的地榆提取物,确定地榆升高白细胞的有效部位；有效部位采用不同乙醇浓度进行洗脱,经过动物实验测定小鼠外周白细胞数量,筛选升高小鼠外周白细胞活性的有效组分；对有效组分再采用聚酰胺、硅胶、SephadexLH-20和ODS C18柱色谱等进行分离纯化,通过理化常数和波谱分析技术,结合文献查阅对化合物进行结构归属；并利用MTT法和CCK-8法测定化合物对M-NFS-60细胞的促增殖作用。结果经过逐步筛选,确定地榆乙酸乙酯部位及水部位具有一定的升白活性；通过对乙酸乙酯部位进行洗脱,在乙酸乙酯部位中发现60%及95%乙醇洗脱物为有效组分,并对活性最佳的60%7醇部位进行洗脱、制备,分离鉴定得到九个化合物,均为三萜类成分,分别为3β,19α-dihydroxyurs-12-en-28-oic acid 28-p-D-glucopyranoside(化合物Ⅰ)；2α,3β,19a-trihydroxyurs-12-en-28-oic acid 28-p-D-galactopyranosyl ester(化合物Ⅱ)；3β-[(a-L-Arabinopyranosyl)oxy]-urs-12,18-dien-28-oicacid 28-β-D-glucopyranosyl ester(化合物Ⅲ)；3β,19α-hydroxyolean-12-en-28-oic acid 28-β-D-glucopyranoside(化合物Ⅳ)；kaji-ichigosideFl(化合物Ⅴ)；ziyuglycoside-I(化合物Ⅵ)；3β-[(a-L-Arabinopyranosyl)oxy]-23-hydroxyurs-12,19(29)-dien-28-oic acid 28-β-D-glucopyranosyl ester(化合物Ⅶ)；3β-[(a-L-Arabinopyranosyl)oxy]-urs-11,13(18)-dien-28-oic acid 28-β-D-glucopyranosylester(化合物ziyu glycoside Ⅱ (化合物Ⅸ)。经过体外细胞活性实验,发现化合物Ⅵ和化合物Ⅸ具有显著的升白活性。结论课题利用系统溶剂法结合活性追踪制备的九个化合物均为皂苷类成分,表明地榆中皂苷类物质具有升高外周白细胞数量的作用,同时确定了地榆升白的物质基础；通过分析其结构,推断物质起效的可能的活性基团取决于3位糖苷化、17为羧基及19位羟基；地榆皂苷主要是作用于骨髓中段,通过促进骨髓细胞MGMT基因及蛋白的表达,促进粒系细胞的增殖分化来发挥升白作用,结合课题组前期研究,为地榆鞣质和皂苷的配伍研究奠定了基础,提供了研究依据；