【摘 要】
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丙酮酸磷酸双激酶(PPDK)具有催化形成磷酸烯醇式丙酮酸(PEP)的功能,叶绿体型PPDK(chPPDK)是C4植物光合途径中生成CO2固定前体物质PEP的关键酶。在C4植物非光合组织和C3植物中还存在
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丙酮酸磷酸双激酶(PPDK)具有催化形成磷酸烯醇式丙酮酸(PEP)的功能,叶绿体型PPDK(chPPDK)是C4植物光合途径中生成CO2固定前体物质PEP的关键酶。在C4植物非光合组织和C3植物中还存在胞质型PPDK(cyPPDK),已有少量研究表明其主要功能是参与糖代谢调节,并有调节非生物逆境适应性功能。本实验室前期研究表明水稻中主要存在cyPPDK,在籽粒灌浆期通过磷酸化水平修饰其活性参与胚乳淀粉积累过程,并在高温下对垩白形成具有调节作用。本研究试图探讨在水稻种子萌发和苗期是否存在PPDK的表达及其对温度的反应。试验选用两个温度敏感性不同的水稻品种(9311和特籼占-25),在水稻种子萌发到出苗期进行34℃、24℃、18℃温度处理,测定处理后不同时间的cyPPDK的基因表达、酶蛋白含量及磷酸化修饰水平的变化,主要研究结果如下:1.在种子萌发过程中,cyPPDK基因在种子吸水后48h开始大量表达,并在72h时达到最大,高温促进、低温抑制cyPPDK基因表达。种子萌发过程中均可检测P PDK蛋白的存在,其含量与基因表达水平不同步,存在温度处理间的差异。PPDK在磷酸化水平与基因表达水平表现一致,高温处理使磷酸化水平升高。上面各指标均存在品种间的差异,9311高于特籼占-25。2.在三叶期水稻叶片中存在chPPDK基因表达,高温处理对9311中chPPDK表达影响不明显,而使特籼占-25中的chPPDK表达量下降,低温导致两个品种中c hPPDK表达量均下降;cyPPDK蛋白量对温度的响应与chPPDK基因基本一致,磷酸化PPDK在高温处理时表达量较高。3.两个品种均表现出高温加快种子萌发的进程,不同温度处理下可溶性糖含量逐渐升高,而淀粉含量逐渐下降,高温促进淀粉降解,提高可溶性糖含量,其中在9311在种子萌发进程、淀粉降解、可溶性糖增加方面均高于特籼占-25。本研究中34℃高温处理没有对水稻种子萌发和幼苗生长产生不利影响,而18℃低温处理产生了明显的抑制作用。结果初步证实cyPPDK及其磷酸化调节在水稻种子萌发期就参与了水稻发育过程,并受到温度影响。水稻苗期叶片中可检测到chPPDK,其生理功能有待研究。
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