为了探明尿激酶型纤溶酶原激活剂(uPA)与其特异性受体uPAR对体外牛卵母细胞核成熟的可能作用,本研究采用免疫组织化学染色技术探讨了未成熟的牛卵丘-卵母细胞复合体(cumulus-oocyte complexes,COCs)中uPA和uPAR的蛋白定位与表达;采用地衣红染色技术研究了体外成熟培养3h、6h与12h后uPA对牛卵母细胞核成熟进程的可能影响;采用竞争性酶联免疫吸附技术检测了体外成熟培养6h后uPA、Amiloride(uPA活性抑制剂)与uPAR一抗对牛COCs和牛卵母细胞中cAMP水平变化的可能调节作用。结果表明:(1)uPAR在牛卵丘与卵母细胞上均有表达,而uPA仅在卵丘细胞上表达。(2)与对照组相比较,添加外源uPA分别处理3h、6h与12h后,牛卵母细胞核成熟进程均被显著延迟(P<0.05);该作用可以被uPA活性抑制剂Amiloride抵消。(3)体外成熟6h后,添加外源uPA能够提升牛COCs与卵母细胞中cAMP水平,与对照组相比差异显著(P<0.05);同时利用Amiloride抑制uPA活性与uPAR抗体阻断受体信号后,uPA对cAMP的促进作用被明显抑制。综上,本研究推测:uPA能够促进体外成熟过程中牛COCs与卵母细胞内cAMP的产生,从而延迟或者阻滞了牛卵母细胞的核成熟进程;卵母细胞内增加的cAMP水平,可能源于卵丘细胞;而uPA是否能够刺激牛卵母细胞自身产生cAMP,还需进一步试验验证。