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从1918至1919年的大流感,到近年来的甲型流感,流感病毒在很大程度上严重威胁人类健康与生命安全。多数流感病毒对抗生素等西药不敏感,并且容易产生耐药性。而研究发现中药有良好的抗流感病毒作用,且不易产生耐药性,毒副作用小,又可调动机体免疫力抵抗病毒。已有一些中药及其制剂应用到流感的临床治疗中。将抗流感病毒有确切疗效的中药广泛应用于临床是迫切而有意义的。复方双花口服液作为常用的抗病毒中成药之一,主要用于急性上呼吸道感染的辅助治疗,尤其对急性扁桃体炎的疗效好。但复方双花口服液的现行质量标准中定性鉴别项只有金银花与穿心莲的薄层鉴别项,含量测定项只有薄层扫描法测定成品中绿原酸含量。很有必要完善薄层鉴别项,对全方中四味中药进行薄层鉴别,并改用灵敏度高,重现性好,准确可靠的HPLC对有效成分进行含量测定。本课题拟从定性鉴别与定量测定两方面入手,提升现质量标准,有利于对复方双花口服液进行更全面的质量控制,为更好地建立全面完善的质量标准提供依据,有利于提升该产品的质量。其主要研究内容与结果如下：1参考2010年版《中国药典》一部中金银花、连翘、穿心莲、板蓝根药材的薄层鉴别方法,优化供试品的前处理方法,适当改进TLC展开条件,建立复方双花口服液中全方四味药的薄层鉴别法。分别将阴性对照溶液、三批供试品溶液、对照品溶液分别点在相应的薄层板上,照薄层色谱法(《中国药典》2010年版一部附录ⅥB)试验。结果显示：供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点,而阴性对照中相应位置无干扰物质的斑点。说明此四种薄层鉴别法专属性强,此口服液中确实添加了四味药材。2参考2010年版《中国药典》一部中金银花、板蓝根药材的含量测定方法与相关文献,优化供试品的前处理方法,建立HPLC对复方双花口服液中药效成分绿原酸和(R,S)-告依春(表告依春)进行含量测定。HPLC测定绿原酸的色谱条件：色谱柱：Dikma Diamonsil C18(4.6mm×250mm,5μm,迪马科技有限公司)；流动相：乙腈-0.1%磷酸溶液(8：92)；流速：1.0mL/min；检测波长为327nm；柱温为35℃；进样体积为10μL；理论板数按绿原酸峰计算应不低于2000。HPLC测定(R,S)-告依春的色谱条件：色谱柱：Dikma Diamonsil C18(4.6mm×250mm,5μm,迪马科技有限公司)；流动相：甲醇-0.02%磷酸(11：89)；流速：1.0mL/min；检测波长为245nm；柱温为35。C；进样体积为10μL；理论板数按(R,S)-告依春峰计算应不低于3000。结果显示,绿原酸和(R,S)-告依春的色谱峰可达到基线分离,绿原酸在1954μg/mL～ 195.40μg/mL内线性关系良好,线性方程为Y=3×107X-37258(R2=0.9999)；(R,S)-告依春在0.4μg/mL～4μg/mL内线性关系良好,线性方程为Y=68707X+2209.8(R2=0.9998).绿原酸和(R,S)-告依春的平均回收率分别为98.83%与101.1%,RSD值分别为1.7%与0.51%.HPLC测得6批复方双花口服液中绿原酸与(R,S)-告依春的平均含量为1.84mg/mL和42.83μg/mL。3参考2010年版《中国药典》一部中金银花、连翘、穿心莲与板蓝根药材的含量测定方法与相关文献,优化供试品的前处理方法,建立HPLC对复方双花口服液中6种药效成分(R,S)-告依春、绿原酸、连翘酯苷A、连翘苷、穿心莲内酯与脱水穿心莲内酯进行含量测定。HPLC测定的色谱条件：色谱柱Waters Sunfire C18 (4.6mm×250mm,5μm,沃特世公司);流动相：甲醇-0.1%磷酸溶液,以梯度洗脱模式；流速：1.0mL/min；(R,S)-告依春、绿原酸、连翘酯苷A与穿心莲内酯的检测波长为240nm,连翘苷的检测波长为225nm,脱水穿心莲内酯的检测波长为245nm；柱温：40℃；进样体积为10μL结果显示,6种有效成分的理论塔板数与分离度均达到要求。通过各项方法学考察,此法具有较强的专属性,在一定范围内线性关系良好,准确可靠。HPLC测得3批复方双花口服液中(R,S)-告依春、绿原酸、连翘酯苷A、连翘苷、穿心莲内酯与脱水穿心莲内酯的平均含量为0.037、1.85、0.44、0.24、0.18与0.036mg/mL。以上研究建立了简便可行的薄层色谱法对复方双花口服液中全方四味中药进行鉴别,准确可靠的高效液相色谱法测定该口服液中绿原酸与(R,S)-告依春的含量。所建立的方法专属性强,切实可行,提升了此口服液的现行质量标准。并且,本文还对该口服液中6种有效成分同时进行含量测定,为其建立更全面的质量标准与更好地质量控制提供依据。