论文部分内容阅读
目的：通过观察黄芪甲苷对阿霉素诱导大鼠H9C2心肌细胞凋亡率、凋亡基因Bax、Bcl-2 mRNA的表达及凋亡因子活性氧自由基(ROS)、线粒体膜电位(△ψm)水平的影响,探讨黄芪甲苷干预阿霉素诱导H9C2心肌细胞凋亡的作用机制。方法：采用大鼠H9C2心肌细胞,选用不同浓度阿霉素(100ng/ml、250ng/ml、500ng/ml)作用于心肌细胞,筛查出最佳实验浓度,建立阿霉素诱导细胞凋亡模型：用黄芪甲苷低、中、高剂量组(10ug/ml、25ug/ml、50ug/ml)作用于模型细胞,选出实验用黄芪甲苷浓度；将实验细胞随机分为空白对照组、模型组和黄芪甲苷组,给药后用Annexin V/PI染色流式细胞仪测定三组细胞的凋亡百分比,RT-PCR法检测心肌细胞Bax、Bcl-2 mRNA的表达水平,利用流式细胞仪检测H9C2心肌细胞中活性氧自由基(ROS)、线粒体膜电位(△ψm)水平。结果：1.心肌细胞的凋亡百分比：与正常对照组(39.72%)比较,模型组(91.06%)心肌细胞的凋亡百分比明显增大；与模型组比较,黄芪甲苷组(60.01%)心肌细胞的凋亡百分比显著减少。2.心肌细胞凋亡基因Bax、Bcl-2 mRNA的表达：Bax mRNA:与正常对照组(1.36±0.31)相比,模型组(3.01±1.43)表达明显升高；与模型组相比,黄芪甲苷组(1.86±0.32)表达明显降低(P<0.05)。Bcl-2 mRNA:与正常组(0.76±0.22)比较,模型组(1.20±0.38)表达升高；与模型组比较,黄芪甲苷组(1.81±0.25)表达明显升高(P<0.01)。3.心肌细胞ROS升高的百分比：与正常组(16.09%)比较,模型组(63.35%)ROS升高的百分比显著增加；与模型组比较,黄芪甲苷组(28.81%)ROS升高的百分比明显减少。4.心肌细胞△ψm降低的百分比：与正常组(26.40%)比较,模型组(51.13%)△ψm降低的百分比显著增加；与模型组比较,黄芪甲苷组(35.46%)△ψm降低的百分比明显减少。结论：1.黄芪甲苷可以降低阿霉素诱导大鼠H9C2心肌细胞的凋亡率；2.黄芪甲苷可以减少阿霉素诱导大鼠H9C2心肌细胞Bax mRNA的表达,增加Bcl-2 mRNA的表达水平；3.黄芪甲苷可以降低阿霉素诱导大鼠H9C2心肌细胞凋亡因子活性氧自由基的水平,提升线粒体膜电位的水平；4.黄芪甲苷抑制大鼠H9C2心肌细胞凋亡的作用机制,可能是与调控凋亡基因Bax、Bcl-2 mRNA的表达与凋亡因子ROS、ΔΨm水平有关。