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鸭圆环病毒(Duck circovirus,DuCV)已在鸭群广泛存在,肉鸭感染后产肉率降低,同时该病毒为免疫抑制病毒,它的存在使得鸭群混合感染的概率增加,造成鸭群大批量死亡,给养鸭业造成严重的经济损失。近几年,鸭群中感染4型I群禽腺病毒(Group I fowl adenovirus serotype 4,FAdV-4)的概率增加,该病毒单纯感染时呈隐性感染,不易被养殖户发现,鸭群出现大批死亡送去实验室检测时,往往呈现混合感染。本实验室针对2020年下半年送检的130份鸭病料进行病原学检测,发现检出最多的病毒为DuCV和FAdV-4,DuCV检出率为56.58%(43/76),FAdV-4的检出率为10.78%(14/130),DuCV和FAdV-4二重感染在DuCV阳性样本检出率为13.95%(6/43)。本课题为探究DuCV和FAdV-4共感染樱桃谷肉鸭的致病性,以DuCV垂直传播为基础,建立了DuCV和FAdV-4同时感染和DuCV继发感染FAdV-4的动物模型,运用病理学和分子生物学等方法进行致病性研究。主要研究内容、试验设计和试验结果如下:1、DuCV和FAdV-4同时感染对樱桃谷肉鸭的致病性本试验一共分4组,第一组(DuCV+FAdV-4组)同时攻入1.48×10~7copies DuCV悬液和8.11×10~8copies FAdV-4悬液,第二组(DuCV组)攻入1.48×10~7copies DuCV悬液,第三组(FAdV-4组)攻入8.11×10~8copies FAdV-4悬液,第四组(Control组)接种1 m L生理盐水。在攻毒后每天对樱桃谷肉鸭进行症状和存活率的记录,于1 dpi、3 dpi、5 dpi、7 dpi、9 dpi、11 dpi和14 dpi每组随机选取3只樱桃谷肉鸭称取体重后,剖杀后采集血液和部分器官进行免疫器官指数、剖检变化、病理切片、生化指标、免疫指标和病毒载量的测定。试验结果显示,DuCV+FAdV-4组的存活率明显低于单纯感染组。感染组的体重低于对照组,DuCV+FAdV-4组免疫器官指数的趋势低于单纯感染组的趋势。为监测肝功能,对谷草转氨酶、谷丙转氨酶、碱性磷酸酶和乳酸脱氢酶进行了测定,发现感染组中这四个值的含量高于对照组。攻毒后对s CD4、s CD8和细胞因子(IL-2、IL-12、IFN-α和IFN-γ)进行测定,共感染组在感染后期总趋势低于单纯感染组。DuCV+FAdV-4组出现心包积液的时间比FAdV-4组早,免疫器官萎缩程度比单纯感染组严重。DuCV+FAdV-4组视野内可见较多心肌纤维轻度水样变性,胞质疏松淡染,其他组心肌纤维形态结构正常。DuCV+FAdV-4组可见较多肝细胞脂肪变性,胞质中可见大小不一的圆形空泡,少量肝细胞气球样变性,细胞肿胀,核居中,胞质空泡化,汇管区胆管周围可见淋巴细胞点状浸润,单纯感染组肝脏病理切片比共感染组轻。所检测器官在整个试验周期均可检测到这两种病毒,并且DuCV+FAdV-4组中的FAdV-4病毒载量在整个试验周期始终高于FAdV-4组,而DuCV+FAdV-4组中的DuCV病毒载量在试验后期高于DuCV组。2、DuCV继发感染FAdV-4对樱桃谷肉鸭的致病性将购买的240只1日龄健康樱桃谷肉鸭随机分为4组。第一组(DuCV组)攻入1.48×10~7copies DuCV悬液,第二组(DuCV+5 dpi+FAdV-4组)先攻入1.48×10~7copies DuCV悬液,感染5天后再攻入8.11×10~8copies FAdV-4悬液,第三组(DuCV+10 dpi+FAdV-4组)先攻入1.48×10~7copies DuCV悬液,感染10天后再攻入8.11×10~8copies FAdV-4悬液,第四组(Control组)接种1 m L生理盐水。在试验周期内每天对鸭子进行存活率和临床症状监测,并且在FAdV-4感染后1 dpi、3 dpi、5 dpi、7 dpi、9 dpi、11 dpi和14 dpi随机抽取3只樱桃谷肉鸭取部分器官观察病理变化和检测病毒载量。试验结果显示DuCV+5 dpi+FAdV-4组在3 dpi出现心包积液,DuCV+10 dpi+FAdV-4组在1 dpi出现心包积液,并且DuCV+10 dpi+FAdV-4组在4 dpi出现大批量死亡,使得病毒载量只能测定到7 dpi,剖检变化可看到肝脏破裂。所检测器官在1 dpi~7 dpi都可以检测到DuCV和FAdV-4,DuCV+10 dpi+FAdV-4组中DuCV病毒载量高于DuCV组,DuCV+5dpi+FAdV-4组中FAdV-4病毒载量低于DuCV+10 dpi+FAdV-4组。综上所述,本研究证明了DuCV和FAdV-4共感染促进了各自的复制,增强了樱桃谷肉鸭的致病性。其中DuCV和FAdV-4同时感染使得樱桃谷肉鸭心包积液出现时间早于单纯感染组,造成的组织损伤和免疫抑制比单纯感染更严重,在试验后期DuCV病毒载量高于DuCV组,FAdV-4病毒载量在整个试验周期始终高于FAdV-4组;DuCV继发感染FAdV-4时,DuCV在体内复制时间越长,继发感染FAdV-4时出现心包积液出现时间越早,同时越能促进FAdV-4的复制。这为今后DuCV和FAdV-4的防控提供了一定的科学思路,同时也为后续研究DuCV和FAdV-4共感染机制明确了方向。