【摘 要】
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目的：阐明阿霉素（doxorubicin，ADM）对骨肉瘤细胞系MG63，骨肉瘤耐药细胞系MG63/DOX,以及原代培养骨肉瘤耐药细胞系GSF-0686细胞体外增殖抑制作用和多药耐药蛋白MRP4在细胞耐药中的
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目的：阐明阿霉素（doxorubicin，ADM）对骨肉瘤细胞系MG63，骨肉瘤耐药细胞系MG63/DOX,以及原代培养骨肉瘤耐药细胞系GSF-0686细胞体外增殖抑制作用和多药耐药蛋白MRP4在细胞耐药中的作用。方法：1）CCK-8法检测ADM对MG63，MG63/DOX，GSF-0686细胞的增殖抑制作用。2）5μmol ADM分别作用于MG63，MG63/DOX，SF-0686三株细胞后，使用液相色谱-串联质谱法测定不同时间点三种细胞内外的ADM药物浓度。3）Western Blotting法与qPCR法检测、比较三种细胞株的MRP4的表达。4）加ADM刺激MG63和MG63/DOX细胞后，采用qPCR法分别检测两种细胞随加药时间和药物浓度变化时肿瘤耐药相关蛋白MRP4基因的表达。结果：1）ADM对MG63，MG63/DOX，GSF-0686的增殖均有抑制作用，但其对MG63/DOX和GSF-0686细胞的增殖抑制作用明显弱于MG63，有显著性差异（P＜0.05）。2）MG63/DOX和SF-0686细胞内ADM浓度明显低于MG63细胞内浓度，同时MG63/DOX和SF-0686细胞外ADM浓度明显高于MG63细胞外浓度。3）耐药细胞株MG63/DOX和SF-0686中MRP4的mRNA与蛋白表达量均高于亲本株MG63。4）ADM可下调MG63/DOX和MG63细胞MRP4的mRNA，但在耐药株中其下调作用弱于亲本株，差异均有统计学意义（p<0.05）。结论：（1）ADM对MG63/DOX和GSF-0686增殖的抑制作用较弱；（2）MG63/DOX细胞和SF-0686细胞对ADM耐药。3)MRP4可能通过表达上调促进细胞内药物外排参与MG63/DOX和SF-0686的耐药作用。
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