【摘 要】
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目的探讨HBV及其抗原成份对α干扰素(IFN-α)抗病毒活性可能存在的拮抗机制。方法逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测IFN-α处理的HepG2.2.15细胞在不同处理时间点的STAT1、STAT
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目的探讨HBV及其抗原成份对α干扰素(IFN-α)抗病毒活性可能存在的拮抗机制。方法逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测IFN-α处理的HepG2.2.15细胞在不同处理时间点的STAT1、STAT2、IRF-9 mRNA表达水平,并比较分析干扰素抗病毒蛋白MxA mRNA在HepG2和HepG2.2.15细胞中的表达;以表达抗病毒蛋白MxA的重组质粒pcDNA3.1-Flag-MxA (wild-type)转染肝胚瘤细胞株HepG2.2.15细胞,采用ELISA和Real-time PCR法分别检测转染的HepG2.2.15细胞上清HBV抗原和细胞外HBV DNA;将HBV核心蛋白表达质粒(pHBc-EGFP)转染HepG2细胞,通过RT-PCR法分析IFN-α抗病毒蛋白MxA、PKR和2’-5’OAS mRNA表达水平。结果研究发现IFN-α处理后HepG2.2.15细胞STAT1、STAT2、IRF-9 mRNA表达水平明显升高,抗病毒蛋白MxA mRNA在HepG2.2.15细胞中未被检测到,而在HepG2细胞中却能表达;转染MxA重组质粒的HepG2.2.15细胞能够表达MxA,并显示MxA具有一定的抗HBV活性;进一步研究发现在转染HBV核心蛋白(HBc)表达质粒的HepG2细胞中,抗病毒蛋白PKR和2’-5’OAS mRNA表达水平未见明显改变,而MxA mRNA表达水平显著降低。结论HBV及其抗原成份(HBc)并不影响α干扰素的JAK-STAT信号转导途径分子mRNA的表达,但可影响抗病毒蛋白如MxA mRNA的表达,进而拮抗IFN-α抗病毒活性。
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