转基因小麦种子贮藏蛋白及其后代分析

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小麦(Triticum aestivum L.)是世界上最重要的粮食作物之一,应用基因工程改良小麦品质在理论研究和实际应用中都具有重要意义.而在应用基因工程技术改良小麦品质的过程中,外源基因在转基因小麦中的稳定遗传则是其成败的关键因素.因此,研究外源基因在转基因植物及其后代中的整合及表达特性是揭示外源基因遗传规律的重要内容.本文以含有外源1Dx5、bar和Gus基因的转基因小麦(B73-6-1)为材料,应用PCR技术检测外源基因在转基因小麦后代中的整合;应用SDS-PAGE、Basta涂布及组织化学检测等技术分别确证了高分子量麦谷蛋白亚基1Dx5,bar及Gus基因在转基因小麦及其后代中的表达.结果表明,在测定的连续三代的转基因小麦中,三种外源基因的整合符合孟德尔遗传规则;并能在各代中稳定表达.同时研究了组成型和组织特异性启动子驱动外源基因表达的特性和规律.结果显示组成型启动子能够驱动外源Gus基因在小麦的任何组织表达;而小麦胚乳特异性启动子则能驱动1Dx5基因在小麦胚乳中表达.通过比较不同转基因小麦外源1Dx5基因的表达特性,探讨了整合的外源1Dx5基因对小麦内源高分子量麦谷蛋白亚基表达的影响,试验结果初步表明,外源基因的导入、整合和表达对受体材料内源高分子量麦谷蛋白亚基基因的表达产生一定的影响.
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