常规磁共振成像不能完全解决早期肝癌的定性诊断问题。随着分子影像学的发展，磁共振免疫成像(Magnetic resonanceimmunoimaging,MRII)引起了人们的关注，MRII是以单克隆抗体为载体，通过抗体与抗原的特异性结合，将顺磁性元素导向到肿瘤内，实现肿瘤定向特异性强化的一种新的成像方法。通过运用这这种靶向性抗体显影剂使早期肝癌的特异性诊断己成为可能。 本研究采用人肝细胞肝癌单抗Hab18标记超顺磁性氧化铁纳米颗粒(Superparamagnetic iron oxide particle,SPIO)，制作出具备免疫活性的靶向显影剂Hab18-SPIO，旨在探讨该靶向显影剂在早期肝癌特异性诊断中的价值和意义。 目的： 1．利用化学交联方法，采用人肝细胞癌单抗Hab18标记SPIO，制作出靶向显影剂Hab18-SPIO，利用电镜及高压液相色谱仪对Hab18-SPIO进行测试，探讨MR免疫对比剂合成的原理及Hab18-SPIO物理性状。 第四军医大学硕士学位论文 2.建立荷人肝癌裸鼠模型，探讨膜相关抗原Hab 189在荷人肝细胞肝癌裸鼠模型的表达及其意义;对Hab 18一SPIO与人肝癌细胞进行体外细胞学结合实验，探讨Hab18一SPIO的免疫活性。 3.静注Hab 18一SPIO后对荷人肝癌裸鼠模型进行MR磁共振免疫成像，探讨MR特异性增强表现以及该抗体显影剂在早期肝癌特异性诊断中的价值和意义。 方法: 1.抗体造影剂Habls一SPIO的制作采用化学交联法，参考Dagmarh6gem~方法进行。并用同样方法制备阴性抗体显影剂sED一sPlo(s ED为葡萄球菌肠毒素D抗体)。使用电镜及高压液相色谱仪对Hab18一SPIO进行测试。 2.人肝细胞癌细胞FHCC一98培养;免疫组化检测肝癌细胞FHcc一98的膜相关抗原Hab 189表达;建立荷人肝细胞癌裸鼠移植瘤模型，剥离肿瘤组织行常规HE染色后光镜观察;免疫组化染色(SP法)检测膜相关抗原Hab 189在裸鼠模型中的表达;采用流式细胞术 (flow eytornrt理，FCM)对5种样品(Habls，Habls一SPIO，SED一SPIO，SED，SPIO)进行侧试，测定MeAb一SPIO的抗体活性. 3.荷人肝癌裸鼠的M犯免疫成像:取荷人肝细胞癌裸鼠40只，分为4组(n二10)，每只荷瘤鼠预先于鼠尾静脉注入含铁量10 mg的大粒子sPIO，使裸鼠体内网状内皮系统(R eticuloendoti五al system，REs)封闭。封闭后6小时，麻醉，分别于各组注入不同显影剂。A组:平扫(未注显影剂);B组:注入Habls一SPIO;C组:注入SPIO;D组:注入sED一sPIo，均按10m叭g含铁量经鼠尾静脉团注。并于注入显影剂前(oh)，及注入显影剂后6h，12h，24h分别对其进行磁共振扫描。再取荷人肝细胞癌裸鼠20只，分为2组(n==10)，麻醉后，分别于各组注入显影剂。E组:注入SPIO;F组:注入Hab18一SPIO，均按lomg/kg含铁量经鼠尾静脉团注。并于注入显影剂前(0h)，及注入显影剂后6h，12h，24h分别对其进行磁共振扫描。 第四军医大学硕士学位论文 结果: 1.经电镜观察和液相色谱分析证明Habls与SPIO有效地结合在一起，通过蛋白质含量测定得到抗体与SPIO的交联率为97.5%。经电镜观察制备的靶向显影剂Hab 18一SPIO粒径在50一70nln之间，并且SPIO中颗粒较小的部分与抗体的交联较多。 2.成功建立了人肝细胞肝癌FHCC一98细胞裸鼠移植瘤模型，FHcc一98细胞和其移植瘤组织表达Hab18g抗原呈强阳性。经流式细胞术检测得到Hab 18一SPIO微粒中的Habls抗体的细胞结合率为96.5%。 3.在网状内皮系统封闭处理后，注入靶向显影剂Hab 18一SPIO 12h及24h时肿瘤组织信号强度降低，出现了明显的靶向性增强，阴性抗体显影剂SED一SPIO及单纯SPIO注入后因为无靶向结合，未能表现出特异性强化。在网状内皮系统未经封闭处理组，Hall 18一SPIO组与单纯SPIO组的信号强度相比无统计学差异，即注入Hab18一SPIO后未能出现明显靶向强化。 结论: 1.成功构建了靶向人肝细胞肝癌表面抗原Hab 189的探针，该探针具有良好的理化性质和免疫活性。 2.在网状内皮系统封闭后，Hab 18·SPIO能够在活体内对有Habls表达的FHCC一98肝癌裸鼠肿瘤模型具有靶向性的增强效果，是理想的MR探针。该探针的进一步改进和完善将为肝癌的早期诊断提供一种新的无创、特异性靶向对比剂。并且，它的成功制备为肿瘤的分子影像诊断提供了新的思路和可信的技术手段，具有广阔的应用前景。