PPR蛋白家族是一种具有独特的螺旋重复结构域(PPR,pentatricopeptide repeat)的蛋白家族,这种蛋白质家族是陆生植物中最大的蛋白家族之一。大部分PPR蛋白能特异性编辑线粒体和叶绿体基因的RNA,从而参与了植物生长发育及调控胚胎形成等过程。然而,参与水稻的生物和非生物胁迫的PPR基因的功能在很大程度上仍然未知。本研究完成的主要内容包括以下三个方面:(1)通过盐胁迫对日本晴水稻中的多个PPR家族基因进行表达量分析,筛选获得Os01g0815900和Os01g0913400基因表达上调。在此基础上对这两个基因进行克隆鉴定确定以及生物信息学的基本分析。(2)本研究构建了原核表达载体进行了PPR蛋白体外原核表达的工作。将Os01g0815900和Os01g0913400的全长CDS序列分别构建到原核表达载体pET-30a(+)中,并转化表达菌株BL21,在大肠杆菌中未表达得到Os01g0815900蛋白,而另一个大小17.5 kD的蛋白经Western blot鉴定该蛋白即为Os01g0913400蛋白,这为后续大量表达与纯化,抗体的制备以及PPR蛋白的功能研究提供了实验基础。(3)为了明确这2个PPR蛋白的亚细胞定位,本研究围绕从水稻盐胁迫实验中筛选得到的2个PPR基因,分别构建荧光标签载体pM999-Os01g0815900-GFP和pM999-Os01g0913400-GFP,将重组载体分别转化水稻黄化苗原生质体,利用激光共聚焦显微镜进行亚细胞定位观察,定位结果显示:Os01g0815900蛋白定位于细胞质;Os01g0913400蛋白定位于线粒体。本研究将为阐释水稻的PPR蛋白家族的亚细胞定位机理以及初步功能的探索奠定基础,也将促进进一步研究PPR蛋白在水稻生长和发育中的作用。