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目的:应用ErbB2受体功能抑制剂AG825,探讨在ErbB2非过表达乳腺癌细胞中是否存在神经调节因子(neuregulin,NRG)/ ErbB2这种配体作用方式的信号通路的活化,进而研究神经调节因子通过NRG/ErbB2信号通路方式对ErbB2非过表达乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖、侵袭转移的作用及分子机制。方法:以人ErbB2非过表达乳腺癌细胞MDA-MB-231和MCF-7为研究对象,台盼蓝拒染法和细胞计数检测细胞生长曲线,免疫细胞化学法和Western-blot法检测细胞中NRG蛋白表达。应用ErbB2受体功能抑制剂AG825处理两株细胞,噻唑兰比色(MTT)法检测比较两株细胞的增殖抑制作用,求出AG825作用MDA-MB-231细胞48h的中效浓度IC50。40μmol/L AG825处理MDA-MB-231细胞48h,Transwell小室进行人工重组基底膜(Matrigel)侵袭和运动实验;明胶酶谱法检测细胞分泌的基质金属蛋白酶(2matrix metalloproteinase 2,MMP-2)、基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase 9,MMP-9)的变化;Western-blot检测细胞中MMP-2、突变型p53(mutant p53,mtp53)和缺氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor-1 alpha,HIF-1α)蛋白表达;RT-PCR检测细胞中HIF-1αmRNA表达的变化;流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡。结果:MDA-MB-231细胞较MCF-7细胞具有较强的增殖生长能力。免疫细胞化学法检测显示在MDA-MB-231细胞内呈NRG显著表达,MCF-7细胞中无NRG表达。Western-blot实验检测MDA-MB-231细胞可见分子量44KD的NRG抗体阳性反应条带。应用ErbB2受体功能抑制剂AG825后,MDA-MB-231细胞的增殖抑制作用明显,AG825作用MDA-MB-231细胞48h的IC50为56.59μmol/L。40μmol/L AG825处理MDA-MB-231细胞48h后,细胞的侵袭、迁移能力均下降(P <0.05);MMP-2、MMP-9的活性降低(P <0.05);MMP-2蛋白表达减少(P <0.05);mtp53、HIF-1α蛋白表达减少(P <0.05);HIF-1αmRNA表达减少(P <0.05);细胞周期阻滞在G0/G1期(P <0.05);细胞凋亡增加(P <0.05)。结论:ErbB2非过表达乳腺癌细胞MDA-MB-231存在神经调节因子分泌,可能通过神经调节因子自分泌或旁分泌配体作用方式使ErbB2受体信号通路处于激活状态,通过NRG/ErbB2信号转导影响MMP-2蛋白表达促进细胞侵袭转移能力。NRG/ErbB2信号转导可上调mtp53蛋白、HIF-1α基因转录及蛋白表达,这与细胞高增殖、低凋亡和侵袭强的恶性行为有关。