目的:蟾毒灵作为传统中药蟾酥中提取的单体,研究表示,蟾毒灵在多种肿瘤均具有强大的抗癌作用。然而,蟾毒灵对卵巢癌的作用及其机制却尚不明晰,因此本文通过网络药理学及实验的方法拟明确蟾毒灵对卵巢癌作用机制。方法:使用Pharm Mapper、CTD、STITCH数据库得出蟾毒灵的药物靶点;与Gene Cards数据库中卵巢癌靶基因筛选出交集基因;使用R语言对靶标进行GO和KEGG富集分析。通过STRING数据库构建PPI网络,借助Cytoscape将其可视化得到蟾毒灵-卵巢癌-靶点蛋白调控网络,计算节点自由度,筛选关键基因;通过cBioPortal数据库查询关键基因在卵巢癌中基因变异情况,利用人类蛋白图谱数据库（HPA）查看关键基因免疫组化情况,利用GEPIA数据库检验关键基因mRNA在肿瘤组织及正常组织中的表达情况。利用分子对接找到与蟾毒灵结合紧密靶点,以其为重点研究对象,通过Western Blot（蛋白免疫印迹技术）、MTT法验证其在卵巢癌中的作用。结果:通过网络药理学方法筛选出蟾毒灵对应靶点352个,卵巢癌疾病靶点7946个,交集靶点107个;GO功能富集分析显示蟾毒灵可能与MAP激酶活性,泛素蛋白连接酶结合,磷酸酶结合等51个生物学过程相关,KEGG富集得到细胞凋亡、MAPK信号通路、乙型肝炎信号通路等141条通路;AKT1、MAPK1、MYC、CASP3、MAPK3、VEGFA可能作为蟾毒灵治疗卵巢癌的关键靶点;免疫组化结果表明,卵巢癌组织中AKT1 MAPK1 CASP3 VEGFA高表达。MYC的抗体染色水平相对降低;而关键靶点的mRNA在卵巢癌细胞中和正常卵巢细胞中的表达结果与之相符。分子对接结果表明蟾毒灵可以与MAPK1紧密结合,实验证明蟾毒灵通过MAPK1/P38MAPK信号通路来抑制卵巢癌细胞的增殖。结论:AKT1、MAPK1、MYC、CASP3、MAPK3等可能作为蟾毒灵治疗卵巢癌的关键靶点。蟾毒灵能对卵巢癌细胞的增殖产生抑制作用,并可能与MAPK1/P38信号通路相关。这些发现为进一步了解蟾毒灵分子功能提供了新的思路,并对其治疗卵巢癌的潜力进行了挖掘。