β-defensins 是重要的天然免疫分子，构成了生物体与外界环境的之间的保护屏障。最近的研究发现，β-defensins 不仅参与抗微生物天然免疫、抗病毒、趋化和免疫增强作用，还在细胞分化、肿瘤发展、组织重构等过程中发挥广泛的功能。Binlb是大鼠附睾特异表达的β-defensin，过玄的研究表明Binlb具有抗菌功能，参与起始精子运动。迄今在大鼠、小鼠和人类分别发现了43，52和39个β-defensin，多数主要在雄性生殖系统成簇表达，而且在附睾中的表达具有区段特异性。为了了解以Binlb为代表的β-defensins的生理功能以及为抗菌肽的开发打好基础，本课题从β-defensins的基因重组表达研究入手，试图探索β-defensins的表达方法，为几十个未知功能的β-defensins研究提供重组多肽。以Binlb为表达对象，我们进行了体外无细胞系统、毕赤酵母、昆虫细胞、大肠杆菌系统和小球藻系统等的摸索表达，在内含肽 (intein)为基础的表达系统 IMPACT-TWIN 中得到了较好的表达。作为对照，同时表达了大鼠非附睾特异表达的RBD1，人类非附睾表达的HBD2。这三个多肽都得到了活性表达，而且都对大肠杆菌和致病性白色念珠菌具有抗菌活力。其中RBD1的重组表达和抗菌活性研究是第一次报道。此外，RBD1和rBinlb还对HIV1感染具有抑制作用。这些表达研究探索为大量的附睾特异和非特异表达的β-defensins结构和生理功能研究打下了一定的基础。 我们还对功能未知的猴附睾特异表达基因ESC461(RNase9)进行了重组表达研究。分别尝试了毕赤酵母，昆虫细胞，大肠杆菌等表达系统，在大肠杆菌系统中得到了较大量的包涵体表达。通过摸索复性条件，发现 ESC461(RNase9)适合进行稀释复性，而且在较高浓度的盐溶液中比较稳定。重组蛋白没有测出核糖核酸酶的活性，但是表现出了抗菌活性。同RNaseA家族成员一样，ESC461(RNase9)具有相似的肝素结合能力。由于ESC461(RNase9)等电点较低，与RNases 家族抗菌活性的机理似乎矛盾，本文认为肝素结合多肽的抗菌机理可能是更恰当的解释。通过对肝素结合多肽的功能分析，我们可以从更加广阔的视野米检视RNase9可能具有的生理功能。对 ESC461(RNase9)的成熟肽序列的ScanProsite扫描分析表明，存在一些可能的结构域和基序。上述综合信息将对 ESC461(RNase9)的功能探索具有指导作用。