【摘 要】
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气道高反应(AHR)是哮喘、慢性阻塞性肺病等呼吸性疾病的主要病理特征之一。其发生的具体机理较复杂。目前,这一类疾病仅仅依赖于激素类药物来治疗且极易导致严重的耐药性和不良反应。因而,寻求新的药物来治疗哮喘等呼吸性疾病是十分必要的。近些年,中药因作用温和、成分天然以及毒性小,被广泛用于多种常见的慢性病和难治性疾病的治疗。同时,中药资源作为重要的天然化合物库,对其成分和药效分析也视为是开发新药的重要途径
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气道高反应(AHR)是哮喘、慢性阻塞性肺病等呼吸性疾病的主要病理特征之一。其发生的具体机理较复杂。目前,这一类疾病仅仅依赖于激素类药物来治疗且极易导致严重的耐药性和不良反应。因而,寻求新的药物来治疗哮喘等呼吸性疾病是十分必要的。近些年,中药因作用温和、成分天然以及毒性小,被广泛用于多种常见的慢性病和难治性疾病的治疗。同时,中药资源作为重要的天然化合物库,对其成分和药效分析也视为是开发新药的重要途径。大量文献记载和实验研究表明垂盆草乙醇提取物(ESSB)具有抗炎、抗氧化及抑制细胞增殖等药效,但有关垂盆草对气管平滑肌的舒张作用还未见有报道。因此,本文在提取ESSB的基础上,通过研究ESSB对离体小鼠气管平滑肌张力、肺功能以及细胞Ca2+浓度的影响,并在L型电压依赖钙通道(LVDCCs)、非选择性阳离子通道(NSCCs)及钙激活的大电导钾通道(BKCa)的基础上阐明了其舒张气管平滑肌的生理学机制,取得的研究结果如下:1.研究结果证实3.98 mg/mL ESSB能阻断L型电压依赖钙通道(LVDCC)电流并抑制LVDCC相关基因的表达来舒张预收缩的气管平滑肌,且对组织并未表现出显著的毒性影响。其中,对于高钾和乙酰胆碱诱导的气管预收缩,ESSB的舒张作用均呈剂量依赖性,且高钾的舒张作用更显著(p<0.01);同时,3.98 mg/mL ESSB能阻断气管平滑肌细胞内Ca2+内流来舒张高钾诱导的气管预收缩。在对LVDCCs影响方面,结果表明3.98 mg/mL ESSB能显著阻断LVDCCs的电流(p<0.001);同时LVDCC相关基因表达检测表明,3.98 mg/mL ESSB能显著影响气管平滑肌组织Cacna1c(p<0.01)。2.进一步的研究结果表明,ESSB对预收缩气管平滑肌的舒张并非由于非选择性阳离子通道(NSCCs)的作用。其中,3.98 mg/mL ESSB对瞬时受体通道3(TRPC3)阻断作用不明显,同时也不能阻断NSCCs电流。3.本研究结果还表明在外源刺激(乙酰胆碱)激活的钙激活K通道(KCa)中,10mM TEA的加入能抑制KCa的开放,继而引发气管的进一步收缩;3.98 mg/mL ESSB对乙酰胆碱诱导的KCa仍然具有开放的作用。4.对于钙激活的大电导K通道(BKCa)在ESSB在舒张气管平滑肌中的作用,3.98mg/mL ESSB能显著诱导BKCa通道开放,并能对Paxiline诱发的气管收缩起到舒张作用;进一步的研究表明,3.98 mg/mL ESSB能显著增加BKCa的电流,并上调BKβ1的表达(p<0.01)。综上所述,本文证实ESSB具有舒张气管平滑肌的作用,其具体机理是通过阻断LVDCCs以及开放BKCa等钙通道来起到舒张作用,且与NSCCs的作用不相关。上述研究成果将为我们将垂盆草应用于哮喘等呼吸疾病的治疗和预防奠定了坚实的理论基础,也为开发靶向LVDCCs、BKCa等通道的单体化合物起到一定的借鉴意义。
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