【摘 要】
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骆驼刺种子无菌苗下胚轴切段在含1.5-2.0mg/L 2,4-D和0.5-1.0mg/L 6-BA的MS培养 基中可100i诱导产生愈伤组织,并在相同培养基上进行继代培养.愈伤组织在含1.5mg/L 6-BA和1.0m
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骆驼刺种子无菌苗下胚轴切段在含1.5-2.0mg/L 2,4-D和0.5-1.0mg/L 6-BA的MS培养 基中可100i诱导产生愈伤组织,并在相同培养基上进行继代培养.愈伤组织在含1.5mg/L 6-BA和1.0mg/L NAA的MS培养基上分化成苗,将苗转至含2mg/L IBA和0.2mg/L NNA的MS培养基 上培养后形成根,得到完整再生植株.再生植株经炼苗后移栽成活.长期继代培养中,愈伤组织具较强频率分化能力及染色体稳定性.组织学观察表明植株主要通过器官发生途径再生.用野生型发根农杆菌A<,4>菌株转化骆驼刺试管苗茎段,获得了大量转化根,建立了骆驼 刺简单、高效的遗传转化系统.研究了影响骆驼刺遗传转化的若干因素.结果表明,外植体经过3d预培养或0.3mol/L甘露醇12h高渗处理后,培养于MS培养基中可有效提高转化率.共 培养时间和外外植体不同取材部位对骆驼刺转化效果有一定影响.用乙酰丁香酮对菌株进行处理,转化率没有明显提高.另外,5i蔗糖,3mg/L GA<,3>,10μmol/L Cu<2+>都对发根 的生长具有促进作用.对转化后的发根通过两种途径进行诱导分化培养,得到了完整转化再生植株.染色体观察显示,转化组织的细胞染色体存在数目改变和不规则分裂变化.
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