鲜百合(冻干)饮片制备及养阴润肺、清心安神药效研究

来源 :河南中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yuanyuan814606754
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目的:制备鲜百合(冻干)饮片并建立最佳制备工艺。对比鲜百合及其不同加工品对咳嗽模型、肺热阴虚模型、失眠模型及抑郁模型的药效,探讨冻干品、晒干品以及鲜百合三者的药效差异。方法:实验1:鲜百合采取低温真空冷冻干燥处理,调节制备参数(温度、时间及压强),制备不同参数条件下的百合冻干样品;并根据2020年版《中国药典》对不同条件下的百合冻干样品进行水分、灰分、浸出物及百合多糖的含量测定,薄层色谱鉴别,确定鲜百合(冻干)饮片的最佳工艺参数。实验2:采用烟熏+内毒素滴鼻+辣椒素诱咳的方法复制大鼠咳嗽模型。模型建立后,随机分为模型组、桂龙咳喘宁组、百合冻干高、低剂量组,百合晒干高、低剂量组,鲜百合高、低剂量组,另设空白对照组。每天给药一次,连续给药21天。末次给药2小时后,测定咳嗽敏感度;称重后腹主动脉采血,测定血清中IL-4,IL-8,IFN-γ及IgE的水平;解剖取右肺匀浆,测定肺组织匀浆中SP,IL-5及TNF-α的水平;取左肺组织包埋固定切片,HE染色镜检肺组织病理变化。实验3:采用腹腔注射PCPA的方法复制小鼠失眠模型。模型建立后,随机分为模型组、复方地西泮组、百合冻干高、低剂量组,百合晒干高、低剂量组,鲜百合高、低剂量组,另设空白对照组。每天给药一次,连续给药21天。末次给药2小时后,测定入睡潜伏期与入睡时间;称重后眼眶采血,测定血清CORT、ACTH及CRH的水平;解剖取下丘脑匀浆,测定下丘脑匀浆中5-HT、DA、NE、GABA、GLU、BDNF及CCK-8的水平;脑组织包埋固定切片,HE染色镜检脑组织病理变化。实验4:采用烟熏+内毒素+甲状腺素的方法复制大鼠肺热阴虚模型。模型建立后,随机分为模型组、孟鲁司特钠组、百合冻干高、低剂量组,百合晒干高、低剂量组,鲜百合高、低剂量组,另设空白对照组。每天给药一次,连续给药21天。末次给药2小时后,测定表观指标评分;称重并采血,测定血清中IgE的水平以及血浆中cAMP、cGMP的水平;制备肺泡灌洗液,测定肺泡灌洗液中IL-4、IFN-γ、CGRP及NEP;取右肺匀浆,测定肺组织匀浆中IL-5、TNF-α及SP的水平;取左肺组织包埋固定切片,HE染色镜检肺组织形态变化。实验5:采用慢性不可预知应激的方法复制小鼠抑郁模型。模型建立后,随机分为模型组、盐酸氟西汀组、百合冻干高、低剂量组,百合晒干高、低剂量组,鲜百合高、低剂量组,另设空白对照组。每天给药一次,连续给药21天。末次给药2小时后,测定强迫游泳实验与悬尾实验的绝望时间;称重并采血,测定各组小鼠血清中IL-10、TNF-α的水平;取脑海马组织,测定各组小鼠海马组织匀浆中TRP、BDNF、MDA、SOD、5-HT、DA及NE的水平;将脑组织包埋固定后,HE染色法观察脑组织形态变化。结果:实验1:鲜百合(冻干)饮片的最佳工艺参数为真空度1mbar,温度-50℃,冷冻干燥时间24h。实验2:与空白组相比,模型组大鼠咳嗽敏感度显著升高;血清中IFN-γ水平显著降低,IL-4、IL-8、IgE水平及肺组织匀浆中SP、IL-5及TNF-α水平显著升高;肺组织明显病变,提示模型复制成功。与模型组相比,百合冻干、百合晒干及鲜百合均能有效改善咳嗽敏感度,上调血清IFN-γ水平,下调血清IL-4、IL-8及IgE水平,下调肺脏SP、IL-5及TNF-α含量,改善肺组织功能。实验3:与空白组相比,模型组小鼠入睡潜伏期与入睡时间显著异常;血清中CORT、ACTH及CRH水平显著升高;下丘脑匀浆中5-HT、DA、NE、GABA、BDNF及CCK-8水平显著降低,GLU水平显著升高;脑组织明显异于正常小鼠,提示模型复制成功。与模型组相比,百合冻干、百合晒干及鲜百合均能有效改善入睡潜伏期与入睡时间,下调血清CORT、ACTH及CRH水平,上调下丘脑中GABA、BDNF、5-HT、DA、NE及CCK-8水平,下调下丘脑中GLU含量;改善脑组织功能。实验4:与空白组相比,模型组大鼠表观指标显著异常;血清中IgE以及血浆中cAMP、cGMP水平显著升高;肺泡灌洗液中IL-4、CGRP及NEP水平显著升高,IFN-γ水平显著降低;肺组织匀浆中IL-5、TNF-α及SP水平显著升高;肺组织明显病变,提示模型复制成功。与模型组相比,百合冻干、百合晒干及鲜百合均能有效改善表观状态,下调血清IgE水平,下调血浆cAMP、cGMP水平,下调肺脏IL-5、TNF-α及SP水平,上调肺泡灌洗液IFN-γ水平,下调肺泡灌洗液IL-4、CGRP及NEP水平;改善肺组织功能。实验5:与空白组相比,模型组小鼠强迫游泳实验与悬尾实验的绝望时间、血清中IL-10、TNF-α水平显著升高;下丘脑匀浆中BDNF、SOD、5-HT、DA及NE水平显著降低,TRP、MDA水平显著升高;脑组织明显异于正常小鼠,提示模型复制成功。与模型组相比,百合冻干、百合晒干及鲜百合均能有效改善入睡潜伏期与入睡时间,下调血清IL-10、TNF-α水平,上调下丘脑中BDNF、5-HT、DA、NE及SOD水平,下调下丘脑中TRP、MDA含量;改善脑组织功能。结论:鲜百合(冻干)饮片的最佳制备工艺参数为真空度1mbar,温度-50℃,冷冻干燥时间24h。鲜百合及不同加工品养阴润肺,清心安神药效作用显著,鲜百合(冻干)饮片药效与鲜百合相似,均明显优于晒干品。
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