外源基因转化大豆的研究

来源 :中国科学院遗传学研究所 中国科学院遗传与发育生物学研究所 | 被引量 : 0次 | 上传用户:w_zhou
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大豆是重要的高蛋白油料作物,通过生物技术-遗传工程的方法培育新品种,增强大豆的抗病虫害能力,改进大豆的品质有重大意义.该研究用B.t.毒蛋白质基因和GUS基因导入大豆,研究外源基因转化大豆的影响因素和期望获得抗虫大豆材料.大豆不同基因型对农杆菌感染的敏感性不同.中黄4号、8502、科丰36号对农杆菌的感染敏感.幼嫩子叶在农杆菌感染前预培养三天,显著提高胚状体发生频率.基因枪轰击未成熟子叶外植体不影响其胚状体发生.当外植体大小为4-6mm时,中黄4号和8502在MSN10培养基上的胚状体发生频率分别为90%,87%.基因枪轰击前后对幼嫩子叶进行高渗处理,可提高转化效率.体细胞胚的脱水处理,提高胚萌发频率.经PCR检测,初步证明获得三个转化植株(基因枪轰击的2株,子叶节农杆菌感染的1株).Southern blot进一步证明了外源B.t.基因已整合到大豆核基因组中,通过X-Gloc组织化学染色,证明外源GUS基因在植物基因组中的表达.该工作为完善大豆的转化体系打下了良好的基础.
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