乳酸菌青贮添加剂是专门用于饲料青贮的一类微生物添加剂,主要作用是有目的地调节青贮料内微生物区系,调控青贮发酵过程,促进多糖与粗纤维的转化,从而有效地提高青贮饲料的质量。 本论文首先对从7株乳酸杆菌中筛出的产酸较高的L-1乳酸杆菌的发酵条件进行了优化,并针对易青贮(以全株玉米为例)和不易青贮(以黑麦草为例)两大类不同青贮原料,进行乳酸菌青贮添加剂的应用研究,最后初步确定乳酸菌青贮添加剂的生产工艺。 通过单因素试验和正交试验确定L-1乳酸杆菌的最佳发酵条件:发酵初始pH值为6.5,接种量为5 %,发酵温度为35~40℃,最佳增殖培养基组分为:MRS培养基+5 %番茄汁+15 %胡萝卜汁+0.01 %L-半胱氨酸盐酸盐。通过在室温23±2℃条件下添加乳杆菌、乳球菌和纤维素酶青贮黑麦草,以评价其单独或联合应用对黑麦草青贮发酵品质的影响。试验结果表明:黑麦草青贮过程中,单独添加乳杆菌,乳杆菌与乳球菌复合添加对黑麦草pH值无明显影响(P >0.05),但发酵质量较对照组有所改善。与对照组相比,乳杆菌和纤维素酶复合添加在整个发酵期明显降低了pH值(P <0.05),增加了发酵产物乳酸(P <0.01)的含量,明显降低了NH3-N(P <0.05)、NDF(P <0.01)和ADF(P <0.05)的含量,蛋白质损失减少约8 %,但丁酸含量略高于其他组。因此,乳杆菌和纤维素酶联合添加可显著改善黑麦草青贮发酵品质。通过在室温25±2℃条件下添加乳杆菌、片球菌和纤维素酶青贮全株玉米,以评价其单独或联合应用对全株玉米青贮品质的影响。结果显示:1. 添加单一乳酸菌和添加复合乳酸菌的各处理组青贮玉米的pH均在4.1~4.3之间,符合良好青贮料的标准。添加复合乳酸菌不能减少青贮过程中的干物质和蛋白质的损失,而添加单一乳酸菌组的干物质损失约为对照组的4/5,蛋白质损失较对照组减少了约13 %。添加乳酸菌的各试验组的NDF和ADF含量都较对照组显著降低(P <0.01),可见添加单一乳酸菌能大大提高玉米青贮饲料的发酵品质和营养价值。2.单独添加纤维素酶会增加玉米青贮过程干物质损失。NDF和ADF分别较对照组降低4.8 %和9.2 %。蛋白质损失比对照组减少18.2 %,乳酸含量是对照组的5.1倍,但乙酸含量显著高于对照组(P <0.01),说明在青贮料中单独添加纤维素酶可促进异型乳酸菌的发酵,降低青贮饲料的品质。3.不同水平纤维素酶和乳酸菌共同作用处理全株玉米,青贮料的pH均在3.5~3.9之间,符合优质青贮料的标准。与对照组相比,明显降低了NDF和ADF(P <0.01)的含量,增加了发酵产物乳酸(P <0.05)的含量,减少了蛋白质损失(P <0.05),氨态氮占总氮的比例显著降低,但添加过多纤维素酶会使青贮料中的纤维素过分降解,增加青贮过程干物质的损失,因此,适宜水平纤维素酶和乳酸菌共同作用处理全株玉米可明显提高青贮饲料的发酵品质和营养价值。最后,初步确定乳酸菌青贮添加剂的生产工艺。选用甘油作保护剂,白炭黑作载体,制得的L-1乳酸杆菌干粉发酵剂活细胞数可达到8.2×109 CFU / g,保藏90 d后,细胞存活率为65.48 %。