背景Papillon-Lefèvre综合征又称掌跖角化牙周病综合征(syndrome of hyperkeratosis palmoplan and periodontosis,OMIM 245000)是一种罕见的常染色体隐性遗传性疾病,临床特征为幼儿早期发生的掌跖角化症和破坏性牙周炎。迄今世界范围内报道的病例超过300例。PLS的病因和致病机制目前尚无确切研究,遗传因素和免疫因素被认为是主要的病因。目前认为PLS最重要的致病原因应与组织蛋白酶C(cathepsin C,CTSC)基因的突变有关。CTSC基因编码组织蛋白酶C,也称为二肽肽酶I,其功能是从蛋白质底物的氨基末端除去二肽,它还具有内肽酶活性。CTSC基因通常在上皮区域内表达,例如手掌,脚掌,膝盖和角化的口腔牙龈。另外在各种免疫细胞中以高水平表达,包括多形核白细胞,巨噬细胞及其前体细胞。CTSC基因参与多种免疫和炎症反应,它在激活丝氨酸蛋白酶过程中起重要作用。丝氨酸蛋白酶在多种炎症和免疫过程中起主要作用,包括细菌的吞噬破坏以及吞噬细胞和T淋巴细胞的活化。因此,CTSC功能的缺乏将导致免疫应答的丧失,导致感染的可能性。目前,CTSC基因在不同种族的个体中已经报道了80种突变。我们对一例郑州大学第一附属医院临床诊断的PLS患者及其父母进行CTSC基因检测,且发现了新的突变位点。目的1.总结一例PLS患者病史、症状、体征、实验室检查及治疗。2.对该患者及其父母的CTSC基因序列分析检测,进一步证实组织蛋白酶C基因的突变是PLS是临床显性的病因。3.回顾分析既往文献已报道的突变位点。方法1.临床资料郑州大学第一附属医院皮肤科临床诊断的一例16岁汉族男性PLS患者,双手足等处皮肤角化、脱屑10余年,牙齿松动、牙龈红肿1年。2.研究方法2.1采集患者及对照组血样标本:分别抽取患者、父母、50名健康成年人外周静脉血5ml。2.2基因组DNA提取:使用Mag-Bind?血液和组织DNA HDQ 96试剂盒抽取基因组DNA。2.3引物的设计、合成及PCR:采用primer5软件设计引物序列,引物合成及PCR产物测序均由上海生工生物公司完成。2.4基因测序分析:采用PCR-Sanger测序,利用Sequencing Analysis 5.11软件对基因序列进行对比分析,确定突变位点。2.5国内外已报道的CTSC基因位点回顾:通过Pubmed、中国知网、万方医学网检索相关文献,统计分析已报道的基因位点。结果1.患者临床资料及治疗效果患者青少年男性,10余年前无明显诱因出现双侧掌跖皮肤角化、脱屑,后波及掌指关节、指间关节和膝关节伸侧,皮疹秋冬季加重。1年前部分牙齿松动,无脱落,伴牙龈红肿、口臭,无牙周溢脓。患者乳牙、恒牙萌出时正常,4岁时乳牙脱落。皮肤科情况:双侧掌跖弥漫性红斑、角化,皮纹增多,皮沟加深,局部上覆鳞屑;跖部和足跟可见蜡黄色角化性斑块,其间杂以多个火山口状凹坑;掌指关节、指间关节和膝关节伸侧可见淡红色、鳞屑性角化性斑片。口腔科情况:牙龈充血肿胀,牙槽骨吸收、萎缩,有牙周袋形成,伴口臭,无牙周出血及溢脓,无牙齿脱落。实验室检查无明显异常。口腔曲面断层片:全口牙槽骨有不同程度吸收,46、47牙牙槽骨吸收至根尖1/3,41根尖见低密度影像。手部皮损病理检查结果:表皮显著的角化过度,颗粒层和棘层明显增厚,在真皮浅层血管周围稀疏的单一核细胞淋巴浸润。依据患者的病史、症状体征、组织病理和基因检测,诊断:掌跖角化牙周病综合征。给予阿维A胶囊、复方甘草酸苷片口服,外用复方丙酸氯倍他索乳膏。治疗1月后,患者的皮损和口腔损害均减轻。2.患者及其父母CTSC基因检测结果对患者及其父母行CTSC基因检测,患者CTSC基因测序结果确定了2个杂合突变,外显子7的第1035位碱基C被A置换(c.1035C>A),其编码的氨基酸由酪氨酸替换为终止密码子(p.Tyr345Ter),变异来源于父亲;外显子7的第1136位碱基A被T置换(c.1136A>T),其编码的氨基酸由天冬氨酸替换为缬氨酸(p.Asp379Val),变异来源于母亲。此两个突变在50例健康人对照中均未检测到。上述突变改变了CTSC基因高度保守区域的氨基酸位点;经Mutation Taster(值:1)和Polyphen-2(分值:1.00)预测有害。推测上述突变很可能影响了CTSC蛋白的正常功能,最后导致疾病发生。3.CTSC基因突变位点回顾PLS相关的CTSC突变已达80种,其中包括错义突变、无义突变、插入及缺失突变。突变主要分布在第6号外显子和第7号外显子内,这部分编码区域是CTSC基因的高度保守区域,该区域突变会影响CTSC的酶活性,使PLS患者CTSC功能几乎完全丧失。结论1.临床确诊1例PLS患者。2.发现两个CTSC基因新的突变位点c.1035C>A、c.1136A>T,CTSC基因突变增至82种,扩大了CTSC基因的突变谱。