论文部分内容阅读
目的：研究淫羊藿苷抑制β-淀粉样蛋白(Aβ)神经毒性及其可能的作用机制。
方法：原代培养的胚胎小鼠大脑皮层神经元，经Aβ1-42处理24小时制备阿尔茨海默病(AD)体外模型，再加入不同浓度(40μg/ml、80μg/ml、160μg/ml、320μg/ml)淫羊藿苷(ICA)并维持24小时，分为正常神经元(对照组)、Aβ处理组、淫羊藿苷组；以MTT、流式细胞技术分别检测三组神经元存活率及死亡率，评估细胞的损伤程度；实时定量PCR(q-PCR)法测定三组可卡因-苯丙胺调节转录肽(CART55-102)mRNA及放射免疫法测定CART55-102的表达，流式细胞技术检测CART抑制剂对淫羊藿苷组神经元死亡率的影响；并通过Western blot观察三组磷酸化ERK(p-ERK)表达水平，q-PCR法及放射免疫法测定P38、JNK、ERK抑制剂对淫羊藿苷组CART55-102表达的影响。
结果：淫羊藿苷不同剂量组神经元存活率(0.69±4.37、0.78±3.84、0.85±4.87、0.71±4.52)高于Aβ处理组(0.59±4.35)(P<0.05)；同时其神经元死亡率(6.00±0.70、5.20±1.41、4.85±0.21、5.25±0.21)低于Aβ处理组(6.15±0.07)(P<0.05)，尤以160μg/ml浓度最为显著；淫羊藿苷组(160μg/ml)神经元中CART55-102 mRNA水平(0.99±0.002)和蛋白表达(72.46±3.66)均高于Aβ处理组(0.66±0.017、48.99±1.40)(P<0.05)，加入CART抑制剂后，增加其Aβ所致的神经元死亡率，阻断淫羊藿苷的作用。Western blot结果：淫羊藿苷组(160ug/ml)神经元中p-ERK表达明显上调；ERK抑制剂阻断淫羊藿苷组神经元中CART55-102的表达。
结论：淫羊藿苷通过ERK途径上调CART55-102表达抑制β-淀粉样蛋白神经毒性作用。