斑马鱼中E2F5和载脂蛋白E的研究

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在筛选斑马鱼生殖细胞中特异表达的基因时,我们发现了一个E2F转录因子家族的成员:E2F5b。它和一个未经研究的E2F5a有着97.9%的同源性。E2F转录因子在细胞周期中起着重要的作用。利用组织半定量PCR和整体原位杂交分析,我们发现E2F5a和E2F5b高量表达于Ⅰ期和Ⅱ期卵母细胞。在早期胚胎发育过程当中,两个E2F5的转录本均一并且广泛地表达于胚胎中,在后来的发育过程中,渐渐集中在大脑中表达。有趣的是,后来E2F5b在眼睛中表达,而我们在眼睛中检测不到E2F5a的表达。我们的结果显示这两个斑马鱼中的E2F5可能对卵母细胞发生以及眼睛的发育起作用。人4型的载脂蛋白E (Apolipoprotein E 4, apoE4)是晚发型阿尔茨海默氏病的最危险的遗传因子。在斑马鱼中有两个apoE的转录本:apoEa和apoEb。前人研究表明apoEb在鱼鳍再生中起重要作用。我们利用整体原位杂交的方法发现,在受精后24小时一直到后来的5天内,apoEa都在斑马鱼的中枢神经系统(包括脊髓神经)中表达。我们使用了两个不重叠的morpholino分别抑制了胚胎中apoEa的翻译。同时,我们将一个5碱基突变的morpholino作为对照。结果显示受精后2到5天,抑制斑马鱼中apoEa的表达将会导致神经元Ⅶ迁移的异常,运动神经轴突不能沿着正确的方向延伸,并且生长也受到了抑制。同时,我们通过利用透射电镜进行细胞学检测发现神经轴突的微管和神经纤维受到了严重的破坏,并且含有髓鞘的轴突明显变少。我们推测斑马鱼的apoEa对于神经轴突的结构、生长以及维持非常重要。
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