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目的:采用HPLC建立不同等级夏天无药材指纹图谱,结合化学模式识别方法进行处理分析,以期为更好的优选高品质夏天无药材提供可行性参考数据;优选醋炙夏天无炮制工艺,为开发夏天无新炮制品提供相关工艺参数和技术参考;通过急性毒性对夏天无及其新炮制品进行安全性评价,以期为临床安全用药提供借鉴;比较夏天无及其醋炙品的镇痛作用,以及探究醋炙夏天无的保肝作用,为后期开发夏天无醋炙品提供科学理论依据。方法:1.基于HPLC法对14批3个等级夏天无药材进行测定,运用“中药谱指纹图谱相似度评价软件”2012A版计算相似度,对其6种生物碱成分进行含量测定,采用主成分分析（PCA）和正交偏最小二乘法-判别分析（OPLS-DA）对14批样品进行模式识别。2.通过单因素试验确定炮制过程中的关键影响因素以及范围,结合响应面法试验设计对醋用量、浸润时间、炒制温度、炒制时间4个因素进行考察,以水分、灰分、浸出物、生物碱含量（原阿片碱、盐酸巴马汀、延胡索乙素、比枯枯灵碱）为衡量指标,以CRITIC法结合G1法计算权重系数,通过综合评分来优选夏天无醋炙工艺。3.采用Bliss法计算生品、醋炙夏天无水提取物的半数致死量（LD50）,连续观察14 d后进行解剖学检查,记算小鼠心、肝、脾、肺、肾脏器指数、检测血液生化指标ALT,AST,BUN,CK,LDH、CA的水平及各脏器HE染色病理切片观察。4.以冰醋酸致小鼠扭体反应对夏天无及其醋炙品提取物进行镇痛评价。5.小鼠随机分为正常组、模型组、阳性组（联苯双酯）（1.2g·kg-1）及醋炙高、中、低（1.8,1.5,0.9 g·kg-1）剂量组,连续灌胃给药7 d后,除正常组小鼠腹腔注射食用油外,其他各组小鼠以0.1g/ml浓度腹腔注射0.4%CCl4食用油溶液,建立急性肝损伤模型。造模24 h后,眼球取血,离心收集血清和肝脏组织。测定血清谷丙转氨酶（ALT）和谷草转氨酶（AST）活性、肝匀浆中超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）的活力、丙二醛（MDA）含量,以及肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-6（IL-6）的表达水平,同时计算肝脏指数并观察肝组织病理变化。结果:1.建立了14产区不同等级夏天无生物碱类成分的HPLC指纹图谱,相似度均大于0.94,说明不同产区的夏天无在成份上无差异,标定了12个峰,并指定了其中6个特征峰。含量测定条件通过方法学验证,精密度、线性关系、准确度、稳定性、重复性良好;利用正交偏最小二乘法-判别分析能较好地区分不同等级夏天无药材,且可判断与夏天无质量相关性较强的化学成分。6种生物碱的含量在不同产区夏天无中仍存在一定差异。2.醋炙夏天无的最优炮制工艺为醋用量30%,浸润时间1h,炒制温度170-190℃,炒制时间5min,OD值为95.64,并通过所得条件平行制备3批样品,计算得OD值分别为95.05、96.51、95.36,其RSD为0.80%。3.生品夏天无和醋炙夏天无的原生药半数致死量分别为48g/kg,54g/kg,急性毒性差异不明显,分别相当于人体（体质量60 kg）安全用量的240和270倍;与正常组相比,生化指标除AST有差异外（P<0.05）,其他ALT,CK,LDH、UREA、CREA的水平差异无统计学差异（P>0.05）。4.与模型组对比,夏天无组能明显减少小鼠扭体次数（P<0.05）,醋炙夏天无结果更明显些。5.与模型组相比,醋炙夏天无组能显著降低小鼠血清中ALT和AST水平（P<0.01）,增强肝组织中SOD、GSH-PX活性（P<0.01）,降低肝组织中MDA含量以及TNF-α、IL-6的水平（P<0.01）,差异具有统计学意义,尤其是醋炙高剂量组效果更显著;此外,还能减轻CCl4对肝脏的病理损伤和肿胀度。结论:采用高效液相色谱法建立的夏天无生物碱类成分指纹图谱特征性强、方法简便,结合多成分化学模式识别技术,可更好地控制其质量,对夏天无等级分类具有指导意义和参考价值;BBD-RSM优化得到夏天无醋炙工艺回归模型的预测值与实测值接近,重复性良好,模型预测效果较好,具有合理性和可行性,为规范夏天无的炮制工艺提供参考,建立的同时测定夏天无中4种生物碱类成分含量的方法快速可靠,可用于夏天无药材的质量控制;夏天无及其醋炙品水提取物LD50>10g/kg原生药,属于实际无毒性,生品夏天无的毒性作用略大于醋炙品夏天无,说明醋炙后有稍微的减毒作用;醋炙夏天无镇痛效果稍优于生品,为中医基础理论醋炙入肝,具有增强止痛作用提供参考依据;醋炙夏天无能有效改善CCl4致小鼠慢性肝损伤,其作用机制可能与抗氧化作用相关,为后期的开发利用提供科学依据。