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目的:研究雄激素是否通过蛋白激酶B-3(AKT3)、I类磷脂酰肌醇-3-激酶的p110催化亚单位(PIK3CA)、钙调蛋白(CALM)、小凹蛋白-1(CAV1)调控大鼠阴茎海绵体组织eNOS表达并影响阴茎勃起功能。方法:8周龄健康雄性SD大鼠36只,随机均分为6组,4周对照组(A组)、6周对照组(B组)、4周去势组(C组)、6周去势组(D组)、4周去势+睾酮替代组(E组)、6周去势+睾酮替代组(F组)。C、D、E、F组切除双侧睾丸及附睾,1d后E、F组隔日1次丙酸睾酮3mg/Kg皮下注射,其余各组等量植物油皮下注射。4周后(A、C、E组)、6周后(B、D、F组)分别检测各组大鼠海绵体内压(ICPmax)/平均颈动脉压(MAP)、血清睾酮(T),通过免疫组化法及Western印迹法分别测定eNOS、P-eNOS、AKT3、PIK3CA、CALM、CAV1在各组大鼠阴茎海绵体中的表达。结果:各组实验大鼠体重(A组:281.9±6.4g、B组:284.2±3.5g、C组:280.9±3.8g、D组:284.9±2.8g、E组:282.5±3.2g、F组:283.7±2.3g)、平均劲动脉压(A组:112.2±2.5mmHg、B组:113.1±3.6 mmHg、C组:108.2±3.3 mmHg、D组:114.5±8.9 mmHg、E组:110.9±4.3mmHg、F组:116.1±2.4mmHg)无显著差异。血清T值:去势组(C组:1.08±0.23nmol/L、D组:0.85±0.20nmol/L)较对照组(A:18.27±1.15nmol/L、B组:18.43±0.91nmol/L)及去势+睾酮替代组(E:17.86±0.47nmol/L、F组:17.91±0.35nmol/L)极显著降低(p<0.01),且去势6周组(d组:0.85±0.20nmol/l)较去势4周组(c组:1.08±0.23nmol/l)显著降低(p<0.05),去势+睾酮替代组(e:17.86±0.47nmol/l、f组:17.91±0.35nmol/l)及对照组(a:18.27±1.15nmol/l、b组:18.43±0.91nmol/l)各组间无显著差异。在3v、5v电压刺激下分别测定各组大鼠icpmax/map比值:去势组(c组:0.28±0.05,0.38±0.04、d组:0.19±0.03,0.24±0.04)较对照组(a:0.71±0.06,0.88±0.03、b组:0.73±0.05,0.86±0.03)及去势+睾酮替代组(e:0.62±0.07,0.81±0.05、f组:0.64±0.04,0.82±0.02)极显著降低(p<0.01),且去势6周组(d组)较去势4周组(c组)显著降低(p<0.05),去势+睾酮替代组(e、f组)及对照组(a、b组)各组间无显著差异。免疫组化结果显示:enos、p-enos主要表达在血管内皮细胞胞膜和海绵窦血管腔内;akt3、pik3ca、calm、cav1主要表达于血管内皮细胞胞浆和胞膜,少数表达于平滑肌细胞。免疫组化显示enos、p-enos、akt3、pik3ca、calm、cav1在大鼠阴茎海绵体中表达情况的积分光密度值(iod):去势组(c组:316.23±44.06,324.56±34.78,351.25±41.23,361.28±51.21,358.24±44.29,412.26±39.96、d组;136.25±32.02,145.26±36.52,204.56±33.61,213.47±35.24,208.36±34.02,263.41±36.25)与对照组(a组:1157.54±250.35,1075.36±243.27,1109.35±263.39,1141.52±258.43,1219.24±273.31,1287.54±242.65、b组:1125.61±232.43,1086.64±264.33,1149.75±271.21,1159.36±241.42,1235.24±239.68,1275.54±262.41)、去势+睾酮替代组(e组:1084.45±229.49,1056.74±233.24,1024.52±238.92,1071.37±276.91,1224.34±261.72,1289.63±251.53、f组:1105.59±252.84,1095.53±248.35,1012.85±250.88,1192.34±259.38,1278.54±257.96,1232.15±267.36)表达相比极显著降低(P<0.01),去势+睾酮替代组(E、F组)与对照组(A、B组)表达相比无显著差异,且6周去势组(D组)比4周去势组(C组)表达显著降低(P<0.05)。Western印迹结果显示eNOS、P-eNOS、AKT3、PIK3CA、CALM、CAV1:去势组(C组:0.24±0.04,0.26±0.03,0.44±0.05,0.34±0.06,0.31±0.04,0.14±0.02、D组:0.11±0.02,0.25±0.03,0.27±0.03,0.22±0.04,0.11±0.02,0.14±0.03)与对照组(A组:0.82±0.05,0.72±0.04,0.98±0.07,0.96±0.09,0.68±0.07,0.69±0.08、B组:0.92±0.09,0.72±0.06,0.94±0.08,0.89±0.07,0.74±0.06,0.69±0.08)、去势+睾酮替代组(E组:0.87±0.08,0.76±0.07,0.94±0.09,0.86±0.08,0.78±0.07,0.79±0.08、F组:0.96±0.09,0.82±0.08,0.95±0.09,0.93±0.07,0.84±0.06,0.75±0.07)表达相比极显著降低(P<0.01),去势+睾酮替代组(E、F组)与对照组(A、B组)表达相比无显著差异,且6周去势组(D组)比4周去势组(C组)表达显著降低(P<0.05),6周去势+睾酮替代组(F组)与4周去势+睾酮替代组(E组)相比无显著差异,6周对照组(B组)与4周对照组(A组)相比无显著差异。结论:本研究结果发现雄激素可能通过上调AKT3、PIK3CA、CALM、CAV1蛋白分子的表达,磷酸化eNOS后激活eNOS促进勃起,然而,确切的机制还应该大量的研究工作,例如采用AKT3、PIK3CA、CALM、CAV1等的阻滞剂或者激活剂以及采用基因转染或者基因敲出等方法,进一步明确分子机制。