DNA 疫苗研究的一个重要任务是如何能更好地提高DNA 疫苗的体液免疫和细胞免疫。近年来的研究显示,HIV 的转录活化因子—Tat 蛋白具有自由通过细胞质膜的特性。现已有不少借助Tat 蛋白的穿膜活性将其它蛋白或DNA 成功导入活细胞内的报道。根据大量文献提供的理论基础设计了实验,将tat 与gag/pol 融合表达,利用Tat 蛋白的穿膜活性将gag/pol 蛋白导入其它活细胞内,从而提高DNA 疫苗免疫水平。还有研究表明Tat49-57 短肽T9(RKKRRQRRR)有较强的穿膜功能,因此我们将这T9 与gag/pol融合表达,研究T9 的插入对DNA 疫苗的免疫水平的影响。本论文的主要工作是构建DNA 疫苗,将tat、T9 与HIV-1gag/pol 融合表达,检测DNA 疫苗的抗原性和免疫原性,研究Tat、T9 蛋白对提高HIV-1 DNA 疫苗免疫水平的作用。实验结果证明tat和gag/pol 融合表达能提高DNA 疫苗的细胞免疫水平。Tat 基因的插入提高HIV-1 DNA 疫苗的有效性,也为tat 应用于其他疫苗中提供了广阔实际应用前景。实验中我们发现T9 与gag/pol 的融合表达并不是象我们预期设想那样能提高HIV-1 DNA 疫苗的免疫水平,反而有所降低,我们将在以后的实验中进一步分析研究其原因。