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目的:
(1)观察高压氧联合复方海蛇胶囊对血管性痴呆大鼠空间学习记忆能力的影响;
(2)通过检测大鼠海马各CA1、CA3和齿状回中NMDAR1、NMMDAR2A和NMDAR2B的表达水平，初步探讨高压氧联合复方海蛇胶囊对血管性痴呆大鼠空间学习记忆改变的可能机制。
方法:将清洁级雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠40只，体重为250-300g，随机分为5组:假手术组（Sham-operated group，SHAM组，n=8）、血管性痴呆模型组（vascular dementia model group，VDM组，n=8）、药物组(Reinhartdt and Sea Cumber Capsule group,RSC组，n=8)、高压氧组（Hyperbaric Oxygen group，HBO组，n=8）、高压氧加药物组（HBO+RSC组，n=8），后四组用线栓法再灌注大脑中动脉梗塞(MiddleCerebral Artery Ocllusion，MCAO)建立血管性痴呆大鼠模型，假手术组栓线只插到颈外动脉和颈内动脉的分叉处。将高压氧组和高压氧加药物组置于40cm*40cm*30cm的特制木箱内，木箱置于高压氧舱内，同时给氧5min后测排气孔浓度为99.0％，接6L/min速率接入医用纯氧（氧浓度为99.5％），以电脑微机程序自动操舱，纯氧加压10 min，于2.5ATA稳压1h，减压15 min，1次/d。同时药物组和高压氧加药物组灌胃复方海蛇胶囊，30mg/Kg/d，3次/日，其余给予等量生理盐水。各组均治疗四周。随后各组大鼠行Morris水迷宫检测定位航行试验和空间探索试验分析大鼠学习记忆能力，历时5日，行为学测试结束后，大鼠常规10％水合氯醛(3.5ml/kg)腹腔注射麻醉，经左心室主动脉快速插管灌注固定，将大鼠断头，继之连续乙醇脱水、二甲苯固定、石蜡包埋，然后取包含海马的脑块连续冠状切片，采用免疫组化方法(immunohistochemistry，IHC)观察大鼠海马CA1、CA3和齿状回(dentate gyrus，DG)中NMDAR1、NMDAR2A和NMDAR2B的表达和分布情况。
结果:
(1)定位航行试验显示，通过分析各组逃避潜伏期和平均游泳路程，SHAM组明显短于HBO组、RSC组、HBO+RSC组和VDM组(P＜0.05);HBO组、RSC组和HBO+RSC组均明显短于VDM组(P＜0.05);HBO+RSC组均明显短于HBO组、RSC组(P＜0.05);HBO组与RSC组相比较，其差异无统计学意义(P＞0.05);
(2)空间探索试验显示，通过分析各组跨越平台次数和平台滞留时间，SHAM组明显多于HBO组、RSC组、HBO+RSC组和VDM组(P＜0.05);HBO组、RSC组、HBO+RSC组较VDM组明显增加(P＜0.05);HBO+RSC组明显多于HBO组、RSC组(P＜0.05);HBO组与RSC组相比较，其差异无统计学意义(P＞0.05);
(3)通过海马免疫组化阳性细胞数量比较显示，海马各组CA1中免疫反应阳性细胞数量比CA3和齿状回明显增多(P＜0.05)，其次是齿状回和CA3;
(4)通过免疫组化方法显示NMDAR1在大鼠海马锥体细胞免疫反应阳性细胞数量的表达水平比较，RSC组、HBO组、HBO+RSC组大鼠锥体细胞免疫反应阳性细胞数量比SHAM组明显增多(P＜0.05); HBO组、RSC组、HBO+RSC组锥体细胞免疫反应阳性细胞数量较VDM组明显减少(P＜0.05);HBO+RSC组锥体细胞免疫反应阳性细胞数量明显少于HBO组、RSC组(P＜0.05);HBO组的锥体细胞免疫反应阳性细胞数量较RSC组无统计学意义(P＞0.05);
(5)通过免疫组化方法显示NMDAR2A在大鼠海马锥体细胞免疫反应阳性细胞数量的表达水平比较，SHAM组、VDM组、RSC组、HBO组、HBO+RSC组大鼠锥体细胞免疫反应阳性细胞数量比较则无统计学意义(P＞0.05);(6)通过免疫组化方法显示NMDAR2B在大鼠海马锥体细胞免疫反应阳性细胞数量的表达水平比较，RSC组、HBO组、HBO+RSC组大鼠锥体细胞免疫反应阳性细胞数量比SHAM组明显增多(P＜0.05);HBO组、RSC组、HBO+RSC组大鼠锥体细胞免疫反应阳性细胞数量较VDM组明显减少(P＜0.05);HBO+RSC组大鼠锥体细胞免疫反应阳性细胞数量明显少于HBO组、RSC组(P＜0.05);HBO组的锥体细胞数量较RSC组无统计学意义(P＞0.05)。
结论:
(1)血管性痴呆大鼠存在空间学习障碍，高压氧及复方海蛇胶囊可改善这种学习记忆障碍，两者联用效果更佳;
(2)血管性痴呆大鼠海马NMDAR1、NMDAR2B的表达可增加，高压氧及复方海蛇胶囊干预可使这些变化减小;
(3)血管性痴呆大鼠海马NMDAR2A的表达可增加，高压氧及复方海蛇胶囊干预无统计学意义;
(4)高压氧及复方海蛇胶囊可能通过减少海马NMDAR1/NMDAR2B表达，从而改善血管性痴呆大鼠空间学习记忆能力，而与NMDAR2A无关。