卡亚叶营养成分分析及调节血糖作用研究

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卡亚(Cnidoscolus spp.)在墨西哥及中美洲地区被当作一种药食兼用的植物。作为蔬菜它营养丰富,其叶片富含铁、钾、钙和维生素C。作为草药,卡亚叶富含黄酮类物质,在中美洲地区曾用于防治糖尿病,有研究证明其降血糖作用与其所含黄酮类物质有关。本文以引种后的卡亚叶为试材,分析了卡亚叶主要营养成分,并以其所含黄酮类化合物为主要功能活性成分,探讨了卡亚叶总黄酮的提取工艺、定性鉴定和含量测定方法。为了探讨卡亚辅助调节血糖的能力,进行了动物降血糖试验,观察了其对糖尿病大鼠的血糖、糖化血清蛋白、总胆固醇、甘油三脂、低密度脂蛋白、高密度脂蛋白,谷丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸氨基转移酶和尿素氮等指标的影响。通过观察其对糖尿病大鼠肝、肾脏器组织的保护作用,初步探讨了其对糖尿病所致并发症的疗效。主要研究结果如下:1、卡亚营养成分分析本实验对卡亚叶片进行了营养成分的检测。卡亚鲜叶各种营养成分的含量如下:水分82.05%、灰分2.07%、粗纤维2.47%、粗蛋白5.21%、粗脂肪0.46%。检测出17种氨基酸,总量4.599%,其中必需氨基酸(色氨酸除外)占氨基酸总量的39.44%,半必需氨基酸占氨基酸总量的21.14%;检测出11种脂肪酸,其中必需脂肪酸占脂肪酸总量的54.51%,N-6脂肪酸:N-3脂肪酸比为3.2:1。维生素鲜重含量分别为:维生素C134.7 mg/100g,烟酰胺33.12mg/100g,维生素B10.36 mg/100g,维生素B20.57 mg/100g,维生素B60.28 mg/100g,类胡萝卜素0.08 mg/1OOg;可溶性糖鲜重含量分别为:麦芽糖388.46mg/100g,蔗糖82.10 mg/100g、葡萄糖23.66 mg/100g。矿物元素(以鲜重记)含量分别为K 445.92mg/1OOg,Ca 196.45mg/100g,Mg 202.13mg/100g,Fe 9.22mg/100g,Mn 5.32mg/100g,Zn 2.41mg/1OOg。结果表明,卡亚不仅蛋白质、粗纤维、维生素含量丰富,而且含有多种人体所必须的氨基酸、矿物质元素,是一种营养价值很高的新资源食品。2、卡亚叶总黄酮提取纯化及定性定量分析卡亚鲜叶黄酮苷类物质经HPLC测定,结果显示,卡亚叶黄酮苷的水解产物主要含有山奈酚、槲皮素和杨梅素,含量分别为1.81±0.158mg/g鲜样、8.17±0.101mg/g鲜样、0.55±0.029mg/g鲜样。可以推断卡亚鲜叶中的黄酮类物质主要是山奈酚,杨梅素以及与各种糖形成的黄酮苷。研究了卡亚叶总黄酮的提取工艺:采用不同乙醇浓度、回流时间、提取次数和溶剂用量4因素3水平的L9(34)正交实验,结果显示影响卡亚叶总黄酮提取的主次因素依次为乙醇浓度>回流时间>提取次数>溶剂用量;其中乙醇浓度对提取率的影响有显著性差异(P<0.05);提取最佳方案为A2B1C2D2,即1O倍量70%乙醇加热回流提取2次,每次2小时。按所确定的最佳提取纯化工艺,提取液浓缩后经石油醚处理,乙酸乙酯纯化,得到纯化的卡亚叶总黄酮提取物,经定性分析证明确为黄酮类物质。进一步采用薄层层析紫外光下可见3个较明显斑点,Rf值分别为0.84、0.55、0.41,其中Rf值为0.84的斑点与槲皮素标准品的行为较一致,推测为槲皮素;经定量分析所得卡亚叶总黄酮提取物平均总黄酮含量26.42%±2.28,提取率0.96%±0.07(n=13)。此工艺操作简便,重复性好。所得提取物进行后续辅助调节血糖研究。3、卡亚叶总黄酮辅助调节血糖动物实验:本试验采取腹腔注射四氧嘧啶(150mg/kg),建立糖尿病大鼠模型,造模成功后,将糖尿病模型大鼠随机分为:模型对照组,阳性药物治疗组,卡亚叶总黄酮提取物低(140mg/kg)、高(210mg/kg)治疗组,同时设一正常组。治疗组每天灌胃给药1次,模型对照组和正常组每天灌胃生理盐水一次。于试验后第2周和第4周末空腹采血测GLU,第4周末测定TC、TG、LDL-C、HDL-C、GSP、ALT、AST和BUN等指标。结果表明:与模型对照组相比,卡亚叶总黄酮能极显著降低GLU, TG和AST水平(P<0.01),能显著降低LDL-C, ALT和BUN水平(P<0.05),升高HDL-C水平。
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