高精料日粮条件下添加槲皮素对山羊瘤胃发酵及蹄部健康的影响

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在现代集约化牛羊养殖业中,为提高动物生产性能与养殖效益,养殖者在生产中普遍使用高精料日粮的饲养模式。但近年来的研究表明,长期使用高精料日粮对瘤胃功能及蹄部健康会产生不利影响。因此,如何调控高精料日粮下反刍动物瘤胃发酵,提高动物抗炎能力及保障动物健康已成为反刍动物营养研究领域的重要方向之一。已有研究发现,植物次级代谢物以其抗菌、抗炎及抗氧化作用,俞来俞受到研究者的关注。榭皮素是植物次生代谢产物中的一种,其具有较强的抗氧化作用,但关于其是否具有改善高精料日粮下反刍动物瘤胃功能及蹄部健康的报道极少。为此,本论文首先通过体外发酵技术探究了槲皮素对山羊瘤胃发酵及微生物的调控作用;在此基础上,通过日粮添加槲皮素的形式,研究了槲皮素对山羊瘤胃健康的影响;在此基础上,通过真胃灌注榭皮素,进一步探究了其对高精料日粮下山羊蹄部健康的影响。论文分三部分进行:1体外研究高精料底物中添加槲皮素对瘤胃发酵的影响本试验采用体外发酵技术,旨在探究槲皮素对瘤胃发酵及瘤胃微生物菌群的影响。发酵底物为0.325 g精料、0.117 g羊草和0.058 g苜蓿,合计0.5 g。研究分为三组,分别为空白组、对照组和处理组。空白组除培养基外,不含底物及槲皮素;对照组含培养基和底物,但不添加槲皮素;处理组除含底物和培养基外,分别添加0.5、1.0和2.0 mM槲皮素。每种处理设4个重复。结果表明,与对照组相比,添加1.0 mM槲皮素和2.0 mM槲皮素可显著提高24小时总产气量(尸<0.05);1mM槲皮素组发酵液中乙酸(P = 0.04)、丁酸(P = 0.02)的浓度显著升高;2mM榭皮素组发酵液中乙酸(P = 0.01)、丙酸(P=0.01)、丁酸(P<0.01)及总 VFA 浓度(P<0.05)显著提高;2mM槲皮素组发酵液中乙丙比(P=0.02)显著增加;Real-timePCR定量结果显示,2.0 mM榭皮素组发酵液中厚壁菌门和拟杆菌门的16S rRNA基因拷贝数(尸<0.01)显著降低。结果说明,在以高精料为底物条件下,添加槲皮素可提高瘤胃微生物发酵活力,促进对底物的降解。2高精料日粮中添加槲皮素对山羊瘤胃发酵、菌群数量及血液指标的影响本试验旨在研究高精料日粮中添加榭皮素对波杂山羊(波尔山羊×长江三角洲白山羊)瘤胃发酵参数、菌群数量及血液相关指标的影响。试验采用随机区组设计,将12头装有永久性瘤胃瘘管的山羊随机分为对照组和处理组,试验期6周。对照组日粮中不添加槲皮素(n = 6),处理组日粮中添加100 mg/kg BW槲皮素。分别在试验期第35、38和41天饲喂前0 h(08:00)和饲喂后2 h、4 h和8 h采集瘤胃液;在试验期第36、39和42天,分别于饲喂前0 h和饲喂后6 h采集颈静脉血液,测定血液抗氧化和生化指标。结果表明:添加榭皮素显著提高了瘤胃pH(尸= 0.047)、异丁酸(尸= 0.001)和戊酸(P = 0.034)浓度;显著提高了 TAOC(尸= 0.031)及还原型谷胱甘肽(P = 0.002)含量和血清尿素(尸= 0.006)水平,同时显著减少血清钾离子(尸= 0.042)浓度,但对瘤胃中厚壁菌门和拟杆菌门微生物的16SrRNA基因拷贝数量无显著影响(P>0.05)。结果说明,高精料日粮条件下,添加槲皮素可提高瘤胃pH,增强机体抗氧化能力,对动物健康具有潜在的保护效应。3真胃灌注槲皮素对山羊机体炎症及蹄部健康的影响本文旨在探究真胃灌注樹皮素对高精料日粮引起山羊炎症的干预作用及对蹄部健康的影响。试验选取10头安装有永久性真胃瘘管波杂山羊(波尔山羊×长江三角洲白山羊),随机分为两组,每组5头。两组山羊均饲喂相同高精料日粮(精粗比为75:25),试验组通过真胃瘘管灌注用5 mL生理盐水溶解的剂量为100 mg/kg BW槲皮素,对照组只添加同体积的生理盐水,试验期为4周。在试验期第28 d于晨饲前采集颈静脉血液,采血结束后,屠宰采集瘤胃液、瘤胃上皮、肝脏和蹄组织。结果显示,与对照组比较,灌注槲皮素可显著提高山羊平均日采食量、体重和平均日增重(P<0.01)及瘤胃中游离脂多糖含量(P<0.05),但是两组山羊血液中游离脂多糖无显著差异(P>0.05);撕皮素显著下调了肝脏中IL-1β的表达水平(尸<0.05);显著增加了IL-10的表达水平(尸<0.05);灌注槲皮素显著降低了蹄中IL-1β的mRNA相对表达量(P<0.01),蹄组织中TNF-α的mRNA相对表达量有降低的趋势(尸<0.05),此外,与对照组比较,灌注槲皮素显著下调了蹄组织中MMP-2(P<0.05)和MMP-9(P<0.01)mRNA相对表达量。结果表明,真胃灌注榭皮素可显著提高山羊体重和日增重,提高山羊肝脏和蹄组织的抗炎能力,具有预防蹄叶炎的潜力。
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