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银杏是集食用、药用和景观于一体的多用途经济作物,是当今天然植物活性物质研发的热点之一。银杏叶子、白果和外种皮皆具有药用价值,而银杏外种皮作为银杏果壳外的肉质部分,在银杏白果采收时,一直被当作废物而丢弃,造成资源的浪费。近年来,国内外对银杏外种皮的应用研究主要集中在生物农药方面,对其抗癌成分的活性研究较少。乳腺癌是女性常见肿瘤,在我国呈高发趋势。三阴性乳腺癌在乳腺癌中恶性程度较高,具有较强的细胞增殖和转移特性。目前,三阴性乳腺癌的治疗主要以化学药物对细胞的毒性治疗,其中存在缺乏有效的靶向治疗手段,并且预后较差面临复发转移的危险,同时还给机体带来严重的副作用。天然活性物质因其长效、温和、低毒副作用等诸多优势,已成为部分乳腺癌症患者的首选。因此,从银杏外种皮中筛选出抗三阴性乳腺癌的天然活性物质,对预防和治疗乳腺癌的发生发展具有重要意义。本课题中我们以三阴性人乳腺癌细胞株MDA-MB-231和鼠乳腺癌细胞株4T-1作为研究对象,采用细胞毒性追踪筛选方法,从银杏外种皮中分离出对MDA-MB-231和4T-1细胞均具有明显毒杀作用的天然活性化合物:2-羟基-6-十三烷基苯甲酸,即银杏酸C13:0,并对其抗癌机理进行了深入研究。主要结果如下:1.采用细胞毒性追踪分离方法,从银杏外种皮中筛选分离到一种单体化合物。试验以对三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231和4T-1具有毒性作用为筛选指标,通过对银杏外种皮的乙醇粗提物进行萃取分离,确定其中表现较高毒性作用的石油醚组分进行硅胶柱层析得到9个组分（S1-S9）,并对其毒性效果较好的S4组分进一步进行半制备液相分离纯化,最终从银杏外种皮中分离到对人源MDA-MB-231和鼠源4T-1细胞均具有显著毒杀作用的一种天然活性单体化合物,纯度为95.28%。采用液质及核磁结构鉴定手段,确定此化合物为2-羟基-6-十三烷基苯甲酸,即银杏酸C13:0（GA13:0）。2.在体外抗癌研究中,银杏酸C13:0均可抑制三阴性人乳腺癌MDA-MB-231和鼠乳腺癌4T-1细胞的增殖能力并表现出相似的抑癌机制,即银杏酸C13:0通过激活芳香烃受体（AhR）信号通路中的相关分子靶点,如:促进上游AhR和芳香烃受体核转位子（ARNT）蛋白的表达,活化外源响应因子（XRE）以及激活下游细胞色素P450 1（CYP1）家族中CYP1B1的蛋白表达,从而抑制MDA-MB-231和4T-1细胞的增殖作用。3.在体内抗癌研究中,我们利用三阴性乳腺癌4T-1细胞构建BALB/C小鼠同源移植瘤模型,研究银杏酸C13:0对小鼠体内乳腺肿瘤生长的抑制效果,并测定其血清中天门冬氨酸转氨酶（AST）,丙氨酸转氨酶（ALT）,尿素氮（BUN）和肌酐（CREA）等指标。结果显示,与对照组相比,银杏酸C13:0可显著抑制小鼠体内乳腺肿瘤的生长和肺转移,同时血清中AST、ALT、BUN和CREA各项检测指标和小鼠体重无明显变化,说明银杏酸C13:0对机体无不良影响。4.银杏酸C13:0抑制小鼠体内乳腺肿瘤生长和肺转移的机理研究。银杏酸C13:0通过激活AhR传导途径:上调AhR和CYP1B1蛋白的表达,并通过诱导线粒体凋亡途径:下调Bcl-2,上调Bax和Cleaved caspase-3蛋白的表达抑制肿瘤生长;此外,还通过抑制上皮间质转化（EMT）相关蛋白变化,如:上调E-cadherin以及下调Snail、Vimentin、MMP-2和MMP-9等蛋白的表达来抑制肿瘤的肺转移。