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实验目的:
通过正交实验,筛选出最佳的水提取工艺;以水蒸气蒸馏法提取挥发油,确定挥发油的提取工艺;确定最佳的成型工艺;建立虫草腺苷的含量测定方法;初步考察其药效,为临床用药提供依据。
实验方法:
1、水提取工艺的优化:设计L9(34)正交实验,以处方中主药川贝母中西贝碱的含量作为检测指标,综合考察药材浸泡时间、加水量、煎煮时间和煎煮次数四个因素对提取效率的影响,最终确定水提取的最佳工艺。
2、确定挥发油的最佳提取工艺:取紫菀、水半夏、陈皮,加入12倍量水浸泡4h,以水蒸气蒸馏法收集挥发油,分别于1、1.5、2、2.5小时测定挥发油的收集量,最终确定挥发油提取的最佳时间。
3、确定最佳的成型工艺:确定润湿剂乙醇的最佳浓度和矫味剂的用量。
4、建立虫草中腺苷含量的测定方法。
5、进行药效学研究:通过氨水致咳动物模型考察其镇咳作用;通过气管段酚红动物模型考察其化痰作用;通过氯化乙酰胆碱和磷酸组胺等容积混合液致豚鼠哮喘动物模型考察其平喘作用;通过鼠耳肿胀法和大鼠纸片包埋法考察其抗炎作用;通过小鼠碳廓清实验考察其提高免疫力的作用。
实验结果:
1、水提取工艺的优化:正交实验表明四个因素对实验结果影响的大小顺序为B>C>D>A,水提取的最佳条件为A2B3C1D2,即在药材中加入12倍量水浸泡4h,水煎煮2次,每次1.5h。
2、挥发油提取的最佳工艺:实验结果表明水蒸气蒸馏2小时可将挥发油提取完全。
3、最佳的成型工艺:取适量85%乙醇制软材,过10-12目筛制颗粒,60℃烘干。喷人挥发油密闭4小时,分装即得。
4、建立了用薄层色谱扫描法对虫草中腺苷的含量进行测定的方法,实现了药品质量的可控性。
5、药效学研究:实验结果证明本颗粒剂具有止咳、平喘、化痰、抗炎、提高免疫力等功效。
实验结论:
虫草川贝止咳颗粒由汤剂改为颗粒剂的提取和成型工艺成本低廉,易于操作,适合工厂大规模生产。制成颗粒剂后,使用、贮藏、携带都很方便,同时减少了服用量,方便了患者服用。