【摘 要】
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手性药物的两个对映异构体是组成上相同,能够互成镜像的一对分子,构象上的差异导致对映体分子在生物活性、毒理和代谢机理上都不同,往往一种旋光异构体有效,而它的对映体药效很小
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手性药物的两个对映异构体是组成上相同,能够互成镜像的一对分子,构象上的差异导致对映体分子在生物活性、毒理和代谢机理上都不同,往往一种旋光异构体有效,而它的对映体药效很小,甚至没有药效或者具有相反的药效。虽然药物对映异构体表现出的药效差别非常大,但是目前相当多的手性药物是以外消旋体的形式出售。美国食品与药品监督管理局正式公布了关于手性药物开发销售的准则性文件,明确指出新上市的手性药物一定要注明对映体纯度,这提高了医药界对高旋光纯度的手性药物的需求。因此在医药工业中,化合物对映体的拆分显得日益重要。在众多的手性拆分技术中,高效液相色谱(highperformanceliquidchromatography,HPLC)法是最简单、重复性最好以及用途最广泛的方法,在手性药物的分离方面表现尤为突出。本文建立了手性流动相添加剂液相色谱法(CMPS)拆分佐匹克隆对映异构体:研究了反相液相色谱系统中β-环糊精(β-cycoldextrin)与佐匹克隆对映异构体手性包合的选择性和色谱保留行为。
在实验中,首先通过Doehlert实验设计优化分离条件,建立了分离度与β-环糊精以及磷酸盐缓冲液浓度关系的数学模型,并通过实验予以验证。
其次,建立了β-环糊精为手性流动相添加剂对佐匹克隆对映异构体拆分的高效液相色谱方法,色谱条件为色谱柱:ZorbaxRx-C18柱(5μm,4.6mm×250mm);流动相为0.12mol/L磷酸盐缓冲液:甲醇(75∶25,V/V),其中含9.0mmol/L的β-环糊精,pH6.0,流速为0.8ml/min;检测波长305nm;进样量20μl;柱温为25℃。
第三,探讨了β-环糊精作为手性流动像相添加剂对佐匹克隆对映异构体的手性选择性和色谱保留行为的影响,系统研究了缓冲液浓度、pH值、甲醇有机溶剂强度以及温度对包合物稳定常数的影响,并做出了定量的描述。在各种实验条件下得到的1/k'对β-环糊精的浓度呈现良好的线性关系,这表明,佐匹克隆对映异构体与β-环糊精之间相互作用是形成的1∶1的环糊精包合物。在最后温度对包合常数稳定性影响的实验结果表明,这种包合过程是一个放热行为,同时还计算手性分离过程的相关热力学参数。
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