【摘 要】
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材料与方法: 采用ELISA检测安徽地区356例肿瘤患者血清中抗弓形虫IgG和IgM抗体;抽提抗体阳性者全血DNA,以弓形虫529bp高度重复序列为靶基因进行PCR检测,阳性标本选择10个位点
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材料与方法: 采用ELISA检测安徽地区356例肿瘤患者血清中抗弓形虫IgG和IgM抗体;抽提抗体阳性者全血DNA,以弓形虫529bp高度重复序列为靶基因进行PCR检测,阳性标本选择10个位点经聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性分析(PCR-RFLP)进行基因型分析,对照ToxoDB分型数据库,确定我国人体感染弓形虫的基因型;以完整分型的弓形虫DNA基因组为模板,PCR扩增Chinese1型的2个重要毒力相关的效应分子ROP16和GRA15,并测序,观察其多态性特征。 结果: ELISA检测肿瘤病人血清中抗弓形虫IgG和IgM抗体,其中,IgG抗体阳性标本21例(阳性率为5.90%);IgM抗体阳性标本8例(阳性率为2.25%)。总抗体阳性率为6.74%。抗体阳性者同时进行PCR检测,结果6例呈阳性,阳性率为20.69%。对PCR阳性标本进行PCR-RFLP分型,2例获得完整分型条带,并鉴定为Chinese1型(ToxoDB#9)。 对Chinese1基因型的两个重要毒力相关因子ROP16和GRA15的PCR扩增和测序见到,Chinese1基因型的人体感染弓形虫毒力因子ROP16第503位氨基酸为503L,与I型和III型的ROPI/III相同;而GRA15在519-602位氨基酸出现大片段缺失,亦即均为II型虫株的GRA15II的多态性特征。 结论: 肿瘤患者接受长期化疗存在弓形虫的隐性感染和活动性感染,表现为血清抗体阳性和Toxo-DNA阳性;血清学总阳性率为6.74%,与普通人群的隐性感染率相近;人体感染虫株基因型为Chinese1型,与动物体内分离虫株基因型一致。以上提示我国人体弓形虫感染来源于动物;Chinese1基因型虫株具有同原型谱系虫株不同的致病机制。
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