由于植物不能像动物那样通过移动来趋利避害，使得植物在进化过程中逐渐形成了与动物不同的应激反应网络体系来适应环境的变化。在各种生物和非生物胁迫信号传递过程中,促分裂原活化蛋白激酶（MAPKs）级联信号通路起到了非常重要的作用。MAPK级联途径参与细胞的生长、分化、分裂、程序性死亡等生命过程，在激素应答、逆境胁迫等过程中也起重要作用。MAPK级联由三级激酶（MAPKKK→MKK→MAPK）构成，具有转移ATP的磷酸基团到下游靶蛋白的丝氨酸、苏氨酸或酪氨酸残基的能力，通过对蛋白磷酸化实现对下游蛋白活性的调节，进而实现信号的传递和放大。根据已有的报道，在发现的植物MAPK级联中MAPKK基因的数量最少，推测在MAPK信号通路中可能会有多个MAPKKK作用于一个MAPKK，且一个MAPKK可能作用于多个MAPK，不同的MAPK信号通路可能共用一个MAPKK。所以，不同的MAPK信号通路之间可能存在相互影响。已有的证据表明MAPKK6可能参与多种生物和非生物刺激信号的传递，在拟南芥和烟草中发现AtMKK6和NQK1参与细胞分裂的调控过程。二穗短柄草是新的禾本科模式植物，其基因组测序已经完成，但目前关于其MAPKK功能的研究报道很少。我们首先利用RT-PCR技术克隆了BdMKK6.2的cDNA全长序列，进而对BdMKK6.2序列进行了生物信息学分析。分析结果表明，BdMKK6.2的cDNA全长1056bp，编码由351个氨基酸组成的蛋白。结构域分析发现BdMKK6.2包含蛋白激酶结构域，具有丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶活性位点。多序列比对结果显示BdMKK6.2含有11个蛋白激酶保守亚结构域，具有MAPKK保守序列S/T-X3-5-S/T。进化分析表明，BdMKK6.2与乌拉尔图小麦TuMPKK1、山羊草AetMAPKK1和水稻OsMKK6亲缘关系较近，同属植物MAPKK家族中的A组。为了进一步研究BdMKK6.2基因的生物学功能，我们将克隆得到的BdMKK6.2cDNA插入到pCAMBIAl304质粒的CaMV35S启动子后，构建了过表达载体pCAMBIAl304－BdMKK6.2，利用农杆菌介导的遗传转化法将其导入烟草中。经过PCR和RT-PCR检测获得了转化成功的5株阳性植株，为后续BdMKK6.2的功能研究奠定了基础。