肢体缺血预处理对脑缺血再灌注损伤VEGF、PDGF-B的影响

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研究背景:脑缺血预处理(Ischemia Preconditioning, PC)是指脑经过短暂亚致死量的缺血预处理,可对随后的严重缺血产生耐受,从而起到保护作用。此现象的发现为脑保护开辟了全新的研究领域,更为重要的是研究发现一个器官(肾、肢体等)的亚致死性缺血可对远隔器官(心、脑等)的致死性缺血产生保护作用,即肢体缺血预处理(Limb Ischemic Preconditioning, LIP), LIP可通过非生命关键器官的缺血预处理对生命关键器官产生保护作用,此保护现象的机制尚未完全阐明。目的:本课题采用HE染色、免疫组织化学方法观察肢体缺血预处理(LIP)对大鼠中动脉缺血再灌注损伤(middle cerebral artery occlusion, MCAO)后血管内皮生长因子(VEGF)、血小板源生长因子-B (PDGF-B)的影响,探讨LIP诱导的脑保护作用机制。方法:健康雄性Wistar大鼠63只,重量200g-220g,随机分为3组:对照组、大鼠大脑中动脉缺血再灌注组(MCAO组:采用线栓法制备MCAO模型)、肢体缺血预处理组(LIP+MCAO组:在制备MCAO模型前采用改良的无创血压测定仪给予双下肢股动脉4个循环的缺血再灌注,每个循环10分钟缺血-10分钟再灌注作为LIP诱导条件)。依据缺血后再灌注时间不同,进一步将对照组、MCAO组和LIP+MCAO组分为6h、24h、3d三个亚组,每个亚组9只大鼠。对各只大鼠于相应的时间点进行神经功能缺损评分后处死。采用HE染色观察大鼠脑组织的病理改变、免疫组织化学法检测脑组织VEGF、PDGF-B、CD31的表达。结果:1、与MCAO组相比较,LIP+MCAO组大鼠神经功能缺损明显改善,比较有统计学意义(P<0.05)。2、光镜下,LIP+MCAO组组织学损害明显减轻。3、CD31免疫组织化学结果显示,LIP+MCAO组的阳性细胞数高于MCAO组,比较有统计学意义(P<0.05),且LIP3天亚组高于6小时亚组、24小时亚组。4、与MCAO组比较,LIP+MCAO组有较多的VEGF、PDGF-B表达,比较有统计学意义(P<0.01), LIP+MCAO组内6小时、24小时、3天亚组比较有统计学意义(P<0.01),且24小时亚组高于6小时、3天亚组。结论:1、肢体缺血预处理对其后的脑缺血再灌注损伤产生明显保护作用。2、肢体缺血预处理明显增加VEGF、PDGF-B的表达,表明肢体缺血预处理产生的保护作用与脑梗死后VEGF、PDGF-B表达的改变密切相关。3、肢体缺血预处理的保护作用可能与血管新生有密切关系。
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