痢疾是由志贺菌引起的以发热、腹泻、血便和腹痛为主要症状的菌痢,具有高传染性、高发病率和高死亡率等严重危害,尤其是在5岁以下儿童中更为突出。痢疾主要由福氏志贺菌和宋内志贺菌引起,近年来我国宋内志贺菌感染率正不断攀升,耐药情况也日趋严峻。疫苗接种被认为是预防和控制传染病最经济有效的手段。细菌表面多糖（如O抗原多糖和荚膜多糖）能够激发机体产生保护性抗体,然而,多糖抗原不能产生长久的保护效果,并且大多对2岁以下儿童无效。将多糖连接到适当的底物蛋白制备成多糖结合疫苗,使其由T细胞非依赖抗原转变为T细胞依赖抗原,则弥补了多糖抗原用作疫苗的不足。多糖结合疫苗的发展和应用成就有目共睹,被称为最成功的疫苗之一。现有的多糖蛋白结合疫苗都是通过化学合成方法制备,存在多种缺陷。如今,除了化学合成法生产多糖蛋白结合疫苗外,还有一种新兴的方法——生物合成法。本研究通过应用生物合成法“一站式”制备宋内志贺菌多糖蛋白结合疫苗,并对其理化、生物学特性及保护性进行评价。首先我们利用基因工程手段敲除宋内菌S7株的O-抗原连接酶基因（waaL）构建S7 waaL表达菌株,之后将糖基化系统质粒(pET28a-PglL-CTB^4573C)导入表达菌株,通过诱导表达在S7 waaL内制备CTB-OPS宋内多糖蛋白结合疫苗;其次,在此基础上将底物蛋白更换成结构与CTB蛋白类似的StxB蛋白,在S7 waaL内制备StxB-OPS宋内多糖蛋白结合疫苗;最后我们对在大肠杆菌中制备CTB-OPS宋内多糖蛋白结合疫苗进行了探索。首先用诱动接合的方法将宋内大质粒（编码O-抗原多糖的合成）转入BL21（DE3）中命名为BSO8,然后将糖基化系统质粒导入BSO8,CTB-OPS宋内多糖蛋白结合疫苗得以在大肠杆菌中成功表达。结果显示CTB-OPS可以在S7 waaL内成功表达,并且通过纯化可以得到高纯度样品,BALB/c小鼠免疫实验证明CTB-OPS具有约72.5%的保护力;StxB-OPS能够表达并获得高纯度样品,小鼠免疫评价中显示对宋内菌只有10%的保护力,而对StxB来源菌痢疾志贺菌Sd197却有50%的保护力。CTB-OPS能够在具有宋内菌大质粒的大肠杆菌BSO8中表达并获得高纯度样品。本研究为宋内志贺菌多糖结合疫苗的开发提供了一种新思路,为宋内菌候选疫苗添加了新成员;也为深入探索StxB作为底物蛋白制备多糖结合疫苗的研究奠定了基础;同时也为后期建立大肠杆菌通用型生物合成多糖结合疫苗技术平台提供了参考。